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Purificação de Tubulin com Modificações Pós-Translacionais Controladas e Isótipos de Fontes Limitadas por Ciclos de Polimerização-Despolimerização
Chapitres
- 00:05Introduction
- 00:34Amplification and Lysis of Cells in Suspension Cultures
- 02:08Amplification and Lysis of Adherent Cells and Mouse Brain Tissue Lysis
- 03:46Sample Preparation for Analysis
- 04:10Clarification, Polymerization, and Depolymerization of the Lysate
- 06:27Evaluation, Quantification, and Characterization of Purified Tubulin
- 07:19Conclusion
Este protocolo descreve a purificação de tubulinas a partir de fontes de pequena/média escala, como células cultivadas ou cérebros de camundongos únicos, usando ciclos de polimerização e despomerização. A tubulina purificada é enriquecida em isótipos específicos ou tem modificações pós-transacionais específicas e pode ser usada em ensaios de reconstituição in vitro para estudar dinâmicas e interações de microtúbulos.
