Un abonnement à JoVE est nécessaire pour voir ce contenu. Connectez-vous ou commencez votre essai gratuit.
Rensing av Tubulin med kontrollerte posttranslasjonelle modifikasjoner og isotyper fra begrensede kilder ved polymerisering-depolymeriseringssykluser
Chapitres
- 00:05Introduction
- 00:34Amplification and Lysis of Cells in Suspension Cultures
- 02:08Amplification and Lysis of Adherent Cells and Mouse Brain Tissue Lysis
- 03:46Sample Preparation for Analysis
- 04:10Clarification, Polymerization, and Depolymerization of the Lysate
- 06:27Evaluation, Quantification, and Characterization of Purified Tubulin
- 07:19Conclusion
Denne protokollen beskriver tubulinrensing fra små/mellomstore kilder som dyrkede celler eller enkeltmushjerner, ved hjelp av polymerisasjons- og depolymeriseringssykluser. Den rensede tubulinen er beriket i spesifikke isotyper eller har spesifikke posttranslasjonelle modifikasjoner og kan brukes i in vitro rekonstitueringsanalyser for å studere mikrotubuldynamikk og interaksjoner.
