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Polarisation von M1 und M2 Human Monocyte-Derived Cells und Analyse mit Durchflusszytometrie bei Mycobacterium tuberculosis Infection
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1Center for Infectious Medicine (CIM), Department of Medicine Huddinge, ANA Futura,Karolinska Institutet, 2Infectious Diseases Division,International Centre for Diarrhoeal Disease Research, Bangladesh, 3Clinical Microbiology, Department of Laboratory Medicine (Labmed), ANA Futura,Karolinska Institutet, 4Childhood Cancer Research Unit, Department of Women’s and Children’s Health,Karolinska Institutet
Chapitres
- 00:04Introduction
- 00:44Peripheral Blood Mononuclear Cell (PBMC) Isolation
- 01:40Monocyte-Derived Cell Differentiation and Polarization
- 03:25Mycobacterium tuberculosis (Mtb) Culture
- 05:00Monocyte-Derived Cell Mtb Infection
- 06:03Flow Cytometry Staining and Analysis
- 07:40Results: Representative Phenotypic M1 and M2 Cell Characterization Before and After Mtb Infection
- 09:47Conclusion
Dieses Protokoll bietet eine Methode zur Untersuchung der Mycobacterium tuberculosis-Infektion bei menschlichen M1- oder M2-polarisierten Makrophagen auf der Grundlage der Differenzierung von peripheren Blutmonozyten zu Makrophagen-ähnlichen Zellen, die mit dem GFP-markierten virulenten Stamm H37Rv infiziert und mit Durchflusszytometrie mit einem 10-Farben-Panel einschließlich der Expression ausgewählter M1/M2-Marker analysiert werden.
