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Profilage cellulaire à haut débit de composés de dégradation de protéines ciblés à l’aide de lignées cellulaires HiBiT CRISPR
Journal JoVE
Recherche en cancérologie
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Journal JoVE Recherche en cancérologie
High-Throughput Cellular Profiling of Targeted Protein Degradation Compounds Using HiBiT CRISPR Cell Lines
DOI:

05:33 min

November 09, 2020

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Chapitres

  • 00:04Introduction
  • 00:50Endpoint Degradation Studies with HiBiT CRISPR Target Proteins in Lytic Format with Optional Cell Viability Fluorescence Analysis
  • 03:07Results: Degradation Compound Analysis in a HiBiT CRISPR Cell Line
  • 04:51Conclusion

Summary

Traduction automatique

Ce protocole décrit la détection luminescente quantitative de la cinétique de dégradation des protéines dans les cellules vivantes qui ont été modifiées à l’aide de CRISPR / Cas9 pour exprimer l’étiquette de détection de protéine endogène sans anticorps fusionnée à une protéine cible. Des instructions détaillées pour calculer et obtenir les paramètres de dégradation quantitatifs, le taux, Dmax, DC 50 et Dmax50 sont incluses.

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