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Mesure de la liaison des nucléotides aux protéines membranaires fonctionnelles intactes en temps réel
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Measuring Nucleotide Binding to Intact, Functional Membrane Proteins in Real Time
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Mesure de la liaison des nucléotides aux protéines membranaires fonctionnelles intactes en temps réel

DOI:
10.3791/61401-v

•

08:33 min

•

March 11, 2021

•

, ,
1Department of Physiology, Anatomy and Genetics,University of Oxford, 2Department of Chemistry and Neuroscience Program,Trinity College

Chapitres

  • 00:04Introduction
  • 00:36Unroofed Membrane Experiments
  • 04:36Patch-Clamp Fluorometry Experiment
  • 05:56Results: Representative Measurement of Nucleotide Binding to Intact, Functional Membrane Proteins in Real Time
  • 07:55Conclusion

Summary

Traduction automatique

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Ce protocole présente une méthode de mesure de la liaison des nucléotides adénine aux récepteurs en temps réel dans un environnement cellulaire. La liaison est mesurée par le transfert d’énergie de résonance de Förster (FRET) entre les dérivés nucléotidiques du trinitrophényle et la protéine marquée avec un acide aminé fluorescent non canonique.

Tags

Nucleotide BindingMembrane ProteinsFRETATPPotassium ChannelDiabetesUnroofed MembraneSonicationMicroscopyANAPFluorescence Imaging

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