Journal
/
Biochimie
/
Het meten van nucleotidebinding aan intacte, functionele membraaneiwitten in realtime
Journal JoVE
Biochimie
This content is Free Access.
Journal JoVE Biochimie
Measuring Nucleotide Binding to Intact, Functional Membrane Proteins in Real Time
Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

Het meten van nucleotidebinding aan intacte, functionele membraaneiwitten in realtime

DOI:
10.3791/61401-v

•

08:33 min

•

March 11, 2021

•

, ,
1Department of Physiology, Anatomy and Genetics,University of Oxford, 2Department of Chemistry and Neuroscience Program,Trinity College

Chapitres

  • 00:04Introduction
  • 00:36Unroofed Membrane Experiments
  • 04:36Patch-Clamp Fluorometry Experiment
  • 05:56Results: Representative Measurement of Nucleotide Binding to Intact, Functional Membrane Proteins in Real Time
  • 07:55Conclusion

Summary

Traduction automatique

Traduction automatique

Dit protocol presenteert een methode voor het meten van adenine nucleotide binding aan receptoren in real time in een cellulaire omgeving. Binding wordt gemeten als Förster resonantie energieoverdracht (FRET) tussen trinitrofenylnucleotidederivaten en eiwit gelabeld met een niet-canoniek, fluorescerend aminozuur.

Tags

Nucleotide BindingMembrane ProteinsFRETATPPotassium ChannelDiabetesUnroofed MembraneSonicationMicroscopyANAPFluorescence Imaging

Article

Embed

AJOUTER À LA PLAYLIST

Usage Statistics

Vidéos Connexes

Gebruik Steiger Liposomen lipide-proximale eiwit-eiwit interacties reconstitueren<em> In Vitro</em

Methode om te visualiseren en te analyseren Membrane interagerende eiwitten door Transmission Electron Microscopy

Het meten van G-eiwit-gekoppelde Receptor Signaling via Radio-gelabeld GTP Binding

Meting van eiwitbinding aan F-actine door co-sedimentatie

Biomoleculaire DSC profielen met Thermolabile liganden te karakteriseren snel vouwen en inbinden van interacties te meten

Dissipatief Microgravimetry te bestuderen van de dynamiek van de Binding van de fosfolipide bindend proteïne Annexine A2 aan lipide Solid-ondersteund Bilayers met behulp van een Resonator Quartz

Vastleggen en identificatie van RNA-bindende proteïnen met behulp van klik chemie-bijgewoonde RNA-interactome vangen (CARIC) strategie

Fluorescerende zilveren kleuring van eiwitten in Polyacrylamide Gels

Monitoren van GPCR-β-arrestin1/2 interacties in real-time levende systemen om de geneesmiddelen ontdekking te versnellen

PeptiQuick, een in één stap incorporatie van membraan eiwitten in Biotinylated Peptidiscs voor gestroomlijnde eiwit binding assays

Read Article