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Charakterisierung auf molekularer Ebene mit robusten biochemischen Ansätzen eines neuen Kinase-Proteins
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Characterization at the Molecular Level using Robust Biochemical Approaches of a New Kinase Protein
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Charakterisierung auf molekularer Ebene mit robusten biochemischen Ansätzen eines neuen Kinase-Proteins

DOI:
10.3791/59820-v

•

11:23 min

•

June 30, 2019

•

, , ,
1Centre de Biophysique Moléculaire, CNRS, UPR 4301,University of Orléans and INSERM

Chapitres

  • 00:04Titre
  • 01:24Transient Transfections
  • 03:21Lysis
  • 05:17Immunoprecipitation
  • 06:59Coimmunoprecipitation Analyses
  • 08:33Results: Synthesized LIMK2-1 Protein, Its Interaction with Kinase ROCK, its Kinase Activity
  • 10:10Conclusion

Summary

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Wir charakterisierten ein neues Kinase-Protein mit robusten biochemischen Ansätzen: Western Blot-Analyse mit einem speziellen Antikörper an verschiedenen Zelllinien und Geweben, Wechselwirkungen durch Coimmunozipitungsexperimente, Kinase-Aktivität, die von Western Blot mit einem phosphospezifischen Antikörper und durch die ATP-Kennzeichnung von32P.

Tags

ImmunoprecipitationKinaseProtein ActivitySubstrateP32-ATP LabelingInhibitorLysis ConditionsNegative ControlCell CultureTransfectionCalcium Phosphate

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