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利用多功能生化方法鉴定新型 ck2 激酶基材
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Biochimie
Identification of Novel CK2 Kinase Substrates Using a Versatile Biochemical Approach
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利用多功能生化方法鉴定新型 ck2 激酶基材
DOI:
10.3791/59037-v
•
11:11 min
•
February 21, 2019
•
John E. Chojnowski
,
Emily A. McMillan
,
Todd I. Strochlic
1
Department of Biochemistry and Molecular Biology
,
Drexel University College of Medicine
Chapitres
00:04
Titre
00:35
Preparation of the Tissue Samples
01:20
Kinase Assay: Thiophosphorylation and Alkylation
02:34
Preparation of the Desalting Columns
03:40
Removal of PNBM
04:42
Immunoprecipitation: Part I
05:32
Protein A/G Agarose Bead Preparation
06:39
Immunoprecipitation: Part II
08:19
Analysis/Validation of Results
09:06
Results: Analysis and Identification of Novel CK2 Kinase Substrates
10:48
Conclusion
Summary
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该协议的目的是标记、丰富和识别复杂生物样品 (如细胞裂解物或组织均质) 中的蛋白激酶 ck2 底物。此方法利用 ck2 生物学的独特方面来实现这一目的。
Tags
CK2
Kinase Substrates
Biochemical Approach
Endogenous Substrates
Cell Lysate
GTPgammaS
PNBM
Sephadex G-25
Affinity Purification
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