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氧电极对 DesB 酶活性和抑制作用的厌氧蛋白纯化及动力学分析
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Biochimie
Anaerobic Protein Purification and Kinetic Analysis via Oxygen Electrode for Studying DesB Dioxygenase Activity and Inhibition
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氧电极对 DesB 酶活性和抑制作用的厌氧蛋白纯化及动力学分析
DOI:
10.3791/58307-v
•
08:31 min
•
October 03, 2018
•
Stacy N. Uchendu
,
Angelika Rafalowski
,
Erin F. Cohn
,
Luke W. Davoren
,
Erika A. Taylor
1
Department of Chemistry
,
Wesleyan University
Chapitres
00:04
Titre
00:33
Anaerobic DesB Purification
02:29
Anaerobic Protein Concentration, Buffer Exchange, and DesB Desalting
04:10
Oxygen Electrode Preparation
05:41
Oxygen Electrode Kinetic Assay
06:48
Results: Representative DesB Dioxygenase Induction, Activity, and Inhibition
07:50
Conclusion
Summary
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在这里, 我们提出了一个协议的厌氧蛋白纯化, 厌氧蛋白浓度, 并随后的动力学表征使用氧电极系统。该方法用酶 DesB, 一种在厌氧环境中纯化和贮存时更稳定、更活跃的酶酶来说明。
Tags
Anaerobic
Protein Purification
Kinetic Analysis
Oxygen Electrode
DesB Dioxygenase
Enzyme Activity
Inhibition
Inorganic Biochemistry
Oxygen-sensitive Metals
Protein Expression
Cell Pellet
Amylose Column
Lysozyme
High-pressure Homogenization
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