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Aislamiento de mastocitos de peritoneo derivado y su caracterización funcional con Ca2 +-proyección de imagen y pruebas de degranulación
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Journal JoVE Immunologie et infection
Isolation of Peritoneum-derived Mast Cells and Their Functional Characterization with Ca2+-imaging and Degranulation Assays
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Aislamiento de mastocitos de peritoneo derivado y su caracterización funcional con Ca2 +-proyección de imagen y pruebas de degranulación

DOI:
10.3791/57222-v

•

11:31 min

•

July 04, 2018

•

, , ,
1Institute of Pharmacology,Ruprecht-Karls Heidelberg University

Chapitres

  • 00:04Titre
  • 00:38PMC Isolation and Cultivation by Intraperitoneal Lavage
  • 03:14Fluorometric Intracellular Free Calcium Concentration Measurement in PMCs
  • 06:38Beta-hexosaminidase Release Measurement in PMCs
  • 08:46Results: Beta-hexosaminidase Release Colorimetric Multi-well Measurements Performed with PMCs Isolated from Wild Type Mice
  • 10:14Conclusion

Summary

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Aquí, presentamos un protocolo para aislar y cultivar células de mástil peritoneales murinas. También describimos dos protocolos para su caracterización funcional: una proyección de imagen fluorescente de la concentración de Ca libre2 + intracelular y una prueba de degranulación basado en la cuantificación colorimétrica de la β-hexosaminidasa lanzado.

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Keywords: PeritoneumMast CellsCalcium ImagingDegranulationIntracellular SignalingExcitable CellsIon ChannelsImmune Cell ActivationMediator ReleaseFura-2RPMI MediumPeritoneal CavityCell SuspensionIL-3SCFIgE Receptors

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