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Isolamento dei mastociti peritoneo-derivati e loro caratterizzazione funzionale con Ca2 +-imaging e degranulazione saggi
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Journal JoVE Immunologie et infection
Isolation of Peritoneum-derived Mast Cells and Their Functional Characterization with Ca2+-imaging and Degranulation Assays
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Isolamento dei mastociti peritoneo-derivati e loro caratterizzazione funzionale con Ca2 +-imaging e degranulazione saggi

DOI:
10.3791/57222-v

•

11:31 min

•

July 04, 2018

•

, , ,
1Institute of Pharmacology,Ruprecht-Karls Heidelberg University

Chapitres

  • 00:04Titre
  • 00:38PMC Isolation and Cultivation by Intraperitoneal Lavage
  • 03:14Fluorometric Intracellular Free Calcium Concentration Measurement in PMCs
  • 06:38Beta-hexosaminidase Release Measurement in PMCs
  • 08:46Results: Beta-hexosaminidase Release Colorimetric Multi-well Measurements Performed with PMCs Isolated from Wild Type Mice
  • 10:14Conclusion

Summary

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Qui, presentiamo un protocollo per isolare e coltivare mastociti peritoneali murini. Inoltre descriviamo due protocolli per la loro caratterizzazione funzionale: un imaging fluorescente della concentrazione intracellulare di gratuito Ca2 + e un test di degranulazione basata sulla quantificazione colorimetrica della β-esosaminidasi rilasciato.

Tags

Keywords: PeritoneumMast CellsCalcium ImagingDegranulationIntracellular SignalingExcitable CellsIon ChannelsImmune Cell ActivationMediator ReleaseFura-2RPMI MediumPeritoneal CavityCell SuspensionIL-3SCFIgE Receptors

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