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Un protocole pour l'élimination des gènes multiples dans les petits organoïdes intestinaux de souris à l'aide d'un concatériste CRISPR
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Chapitres
- 00:05Titre
- 00:50Cloning of gRNAs into the CRISPER-concatemer Vector
- 03:40Assessing Success of Cloning by Restriction Digest
- 05:28Preparing Intestinal Organoids for Electroporation
- 08:08Electroporation
- 10:36Results: Successful Generation of CRISPER-concatemers and Electroporation of Intestinal Organoids
- 11:24Conlcusion
Ce protocole décrit les étapes pour le clonage de plusieurs ARN à guide unique dans un vecteur de vecteur de guide RNA, qui est particulièrement utilisé dans la création de knockouts multi-gènes utilisant la technologie CRISPR / Cas9. La génération de double knockouts dans les organoïdes intestinaux est une application possible de cette méthode.
