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Nachweis und Visualisierung von DNA-schadeninduzierten Proteinkomplexen in Suspensionszellkulturen unter Verwendung des Proximity Ligation Assays
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Detection and Visualization of DNA Damage-induced Protein Complexes in Suspension Cell Cultures Using the Proximity Ligation Assay
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Nachweis und Visualisierung von DNA-schadeninduzierten Proteinkomplexen in Suspensionszellkulturen unter Verwendung des Proximity Ligation Assays

DOI:
10.3791/55703-v

•

13:10 min

•

June 09, 2017

•

, , , , ,
1Department of Pathology,Academic Medical Center, University of Amsterdam, Lymphoma and Myeloma Center Amsterdam (LYMMCARE)

Chapitres

  • 00:05Titre
  • 01:02Treatment of Cells and Induction of DNA Damage
  • 03:21Cytocentrifugation, Fixation, and Permeabilization
  • 05:35Blocking and Primary Antibody Incubation
  • 07:19PLA Probes, Ligation, and Amplification
  • 09:04Mounting and Imaging
  • 10:34Results: The PLA Assay Detects Direct Protein-protein Interactions in Suspension Cell Cultures
  • 12:03Conclusion

Summary

Traduction automatique

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Hier wird gezeigt, wie der in situ Proximity Ligation Assay (PLA) verwendet werden kann, um die direkten Protein-Protein-Wechselwirkungen zwischen ATM und p53 in Suspensionszellkulturen, die genotoxischen Stress ausgesetzt sind, zu detektieren und zu visualisieren.

Tags

Keywords: DNA DamageProtein ComplexesProximity Ligation AssaySuspension Cell CulturesDNA RepairATM InhibitorNCSBV-173 CellsCell Cycle ArrestMicroscopy Slides

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