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近接ライゲーションアッセイを用いた懸濁細胞培養におけるDNA損傷誘発タンパク質複合体の検出と可視化
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Detection and Visualization of DNA Damage-induced Protein Complexes in Suspension Cell Cultures Using the Proximity Ligation Assay
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近接ライゲーションアッセイを用いた懸濁細胞培養におけるDNA損傷誘発タンパク質複合体の検出と可視化

DOI:
10.3791/55703-v

•

13:10 min

•

June 09, 2017

•

, , , , ,
1Department of Pathology,Academic Medical Center, University of Amsterdam, Lymphoma and Myeloma Center Amsterdam (LYMMCARE)

Chapitres

  • 00:05Titre
  • 01:02Treatment of Cells and Induction of DNA Damage
  • 03:21Cytocentrifugation, Fixation, and Permeabilization
  • 05:35Blocking and Primary Antibody Incubation
  • 07:19PLA Probes, Ligation, and Amplification
  • 09:04Mounting and Imaging
  • 10:34Results: The PLA Assay Detects Direct Protein-protein Interactions in Suspension Cell Cultures
  • 12:03Conclusion

Summary

Traduction automatique

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ここでは、 in situ Proximity Ligation Assay（PLA）を使用して、遺伝毒性ストレスに曝された懸濁細胞培養におけるATMとp53との間の直接タンパク質 - タンパク質相互作用の検出および可視化を実証する。

Tags

DNA DamageProtein ComplexesProximity Ligation AssaySuspension Cell CulturesDNA RepairATM InhibitorNCSBV-173 CellsCell Cycle ArrestMicroscopy Slides

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