Summary

新生児マウスにおける低酸素虚血期における連続映像脳波

Published: June 11, 2020
doi:

Summary

本稿では、低酸素虚血を起こす新生児マウスにおける複数の深度電極を用いた連続的なビデオEEG記録の方法を説明する。

Abstract

低酸素虚血は新生児発作の最も一般的な原因である。動物モデルは、新生児発作や低酸素虚血の根底にあるメカニズムと生理学を理解するために重要です。本稿では、新生児マウスにおける連続的な脳波(脳波)モニタリングを行い、低酸素虚血中の脳波背景を解析する方法を説明する。ビデオとEEGを併用すると、発作のセミオロジーの記述と発作の確認が可能になります。この方法は、実験期間におけるパワースペクトログラムおよびEEG背景パターンの傾向を分析することも可能である。この低酸素虚血モデルでは、この方法は、損傷前のEEG記録が規範的ベースラインを得ることを可能にし、傷害および回復の間に。総モニタリング時間は、4時間以上母親から子犬を分離できないことによって制限されます。この原稿では低酸素虚血性発作のモデルを用いてきたが、新生児ビデオ脳Gモニタリングのこの方法は、げっ歯類の多様な疾患および発作モデルに適用することができる。

Introduction

低酸素性虚血性脳症(HIE)は、新生児1000人に1.5人の新生児に影響を及ぼし、新生児発作の最も一般的な原因である1,2である。生き残った乳児は、脳性麻痺、知的障害、てんかん3,4,5などの様々な神経障害の危険にさらされています。

動物モデルは、低酸素虚血および新生児発作の病態生理を理解し、調査する上で重要な役割を果たす6,7。修飾されたヴァンヌッチモデルは、出生後10日目(p10)7,8に低酸素虚血(HI)を誘導するために使用される。この年齢のマウスの子犬は、人間の新生児の完全な用語に神経学的に大まかに変換します 9.

この傷害モデルと組み合わせて使用される連続ビデオ脳波(EEG)モニタリングは、新生児低酸素虚血性発作のさらなる理解と特徴付けを可能にする。これまでの研究では、ビデオ録画、限られたEEG記録、テレメトリEEG記録10、111213141516など、げっ歯類の新生児発作を分析するための様々な方法を使用してきました。以下の原稿では、低酸素虚血中のマウスの子犬に連続したビデオEEGを記録する過程について詳しく述べる。新生児マウスの子犬における連続的なビデオEEGモニタリングのためのこの技術は、様々な疾患および発作モデルに適用することができる。

Protocol

すべての動物研究は、バージニア大学の施設動物のケアと使用委員会(IACUC)によって承認されました。 1. 電極建物/ケーブルビルディング 単極絶縁ステンレス鋼線(0.005″裸径0.008″被覆)を使用して、メスソケットコネクタ(メスレセプタクルコネクタ0.079)で接続された電極を作ります。 特別なカスタムケーブルを使用して、動物をアンプに接続します。 ?…

Representative Results

発作セミロジー 新生児低酸素-虚血曝露は、マウスの全身発作と焦点発作の両方をもたらす(図1A-C)。ビデオ脳波録画により、電解調査結果をビデオの動作と相関させます。これらの行動は、以前に公表された新生児げっ歯類行動発作スコア(BSS)16を用いて採点された。BSS に加えて、行動が焦点/一方的、二国間、?…

Discussion

我々は、低酸素虚血発作の間に新生児マウスにおける連続的なビデオ-脳細胞モニタリングのためのモデルを提示した。EEGと連動したビデオ分析により、発作セミロジーの特徴付けが可能になります。EEGの分析は、パワースペクトログラムの抽出とバックグラウンド振幅分析を可能にします。

電極の配置中または不正確な配置時の損傷は結果に大きな影響を与える可能性?…

Divulgations

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

我々は、次の資金源を認める: NIH NINDS – K08NS101122 (JB), R01NS040337 (JK), R01NS044370 (JK), バージニア大学医学部 (JB).

Materials

SURGERY
Ball Point Applicator Metrex Research 8300-F i-bond applicator
Cranioplast (Powder/Resin) Coltene H00383 Perm Reline/Power
I-Bond Kulzer GmbH, Germany
LOOK Silk Suture Surgical Specialities Corporation SP115 LOOK SP115 Black Braided Silk Non absorbable surgical suture
RS-5168 Botvin Forceps Roboz Surgical Instrument RS5168 Forcep for surgery/ligation
RS-5138 Graefe Forceps Roboz Surgical Instrument RS5138 Forcep for surgery/ligation
UV light for I-Bond Blast Lite By First Media BL778 UV ligth for I-bond
Vannas Microdissecting Scissor Roboz Surgical Instrument RS5618 Scissor for ligation
Vet Bond 3M Vetbond 1469SB Vet Glue
HYPOXIA
Hypoxidial Starr Life Science
Oxygen sensor Medical Products MiniOxI- oxygen analyzer/sensor for hypoxia rig
EEG RECORDING
Female receptacle connector 0.079" Mill-Max Manufacturing Corp 832-10-024-10-001000 Ordered from Digikey
Grass Amplifier Natus Neurology Incorporated Grass Product
LabChart Pro ADI Instruments Software to run the system
Male Socket Connector 0.079" Mill-Max Manufacturing Corp 833-43-024-20-001000 Ordered from Digikey
Operational Amplifier Texas Instruments, Dallas, TX, USA TLC2274CD TLC2274 Quad Low‐Noise Rail‐to Rail Operational Amplifier
Operational Amplifier Texas Instruments, Dallas, TX, USA TLC2272ACDR TLC2274 Quad Low‐Noise Rail‐to Rail Operational Amplifier
Stainless Steel wire A-M Systems 791400 0.005" Bare/0.008" Coated 100 ft
Ultra-Flexible Wire McMaster-Carr 9564T1 36 Gauze wire of various color

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Citer Cet Article
Wagley, P. K., Williamson, J., Skwarzynska, D., Kapur, J., Burnsed, J. Continuous Video Electroencephalogram during Hypoxia-Ischemia in Neonatal Mice. J. Vis. Exp. (160), e61346, doi:10.3791/61346 (2020).

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