Дрозофила Оптогенетика: метод манипулирования нейронными цепями
Published: April 30, 2023
Abstract
Источник: де Врис, S. E., Clandinin, Т. Оптогенетическая стимуляция побега Поведение в Drosophila меланогастер. J. Vis. Exp. (2013).
Оптогенетика позволяет использовать свет для манипулирования нейронами, которые генетически модифицированы, чтобы выразить специфические опсины-светочувствительные белки, активация света которых вызывает изменение состояния нейрона. Здесь мы описываем оптогенетический подход в Drosophila с помощью opsin Channelrhodopsin2. В примере протокола содержится анализ оптогенетики, установленный для изучения нейрональной схемы, которая стоит за поведением мухи.
Protocol
Этот протокол является выдержкой из де Врис и Clandinin, Оптигенетическая стимуляция побега Поведение в Drosophila меланогастер, J. Vis. Exp. (2013). 1. Создать Channelrhodopsin мух Кросс UAS-ChR2 летает с водителем Gal4 по вашему выбору, мы используем G105-Gal4, который выражается в нейронах …
Representative Results
Рисунок 1: Экспериментальная настройка, показывающая платформу с вертикальным держателем и четырьмя холодными шлангами, держащими тепловые раковины со светодиодными массивами, прикрепленными к ним. (A)Настройка под окруж?…
Materials
| Reagent | |||
| All-trans Retinal | Advance Scientific Chemical Inc | R3041 | |
| Equipment | |||
| Heat Sink 9.2 C/W | Luxeonstar | LPD30-30B | 30 mm square X 30 mm high |
| Carclo 18° Tri-Lens | Luxeonstar | 10507 | |
| Blue Rebel LED on Tri-Star Base | Luxeonstar | MR-B0030-20T | 470 nm, 174 lm @ 700 mA. |
| 700 mA BuckPuck DC Driver | Luxeonstar | 3021-D-E-700 | |
| Wiring Harness for BuckPuck Driver | Luxeonstar | 3021-HE | |
| Pre-cut thermal adhesive tape | Luxeonstar | LXT-S-12 | 20 mm Hex Base |
| Snap-Loc Coolant Hose, ¼" ID | McMaster-Carr | 5307K49 | |
| Snap-Loc Coolant Hose Connector | McMaster-Carr | 5307K39 | ¼" NPT Male |
| Laboratory Grade Switching Mode Programmable DC Power Supply | BK Precision | 1698 | |
| Exilim camera | Casio | EX-FH20 |
Citer Cet Article
Drosophila Optogenetics: A Method to Manipulate Neuronal Circuits. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20149, doi: (2023).