Dissociazione a singola cellula di Caenorhabditis elegans: Un metodo per isolare le cellule vive

Published: April 30, 2023

Abstract

Fonte: Germania, E.M., et al. Isolamento di specifiche popolazioni neuronali da nematodi Caenorhabditis elegans. J. Vis. Exp. (2019).

Questo video descrive un metodo per dissociare interi vermi in una sospensione a singola cellula adatta per FACS o immunoprecipitazione di cellule intatte.

Protocol

Questo protocollo è un estratto da Germany et al, Isolation of Specific Neuron Populations from Roundworm Caenorhabditis elegans, J. Vis. Exp. 1. Preparazione e raccolta di vermi invecchiati per l’isolamento cellulare NOTA: Di seguito è spiegato l’isolamento dei neuroni colinergi…

Materials

Agar, Molecular Biology Grade VWR A0930
CaCl2 Sigma C5670
Contess Automated Cell Counter Invitrogen Z359629
DTT USBiological D8070
FBS Omega Scientific FB-02
Fluorodeoxyuridine Sigma F0503
HEPES Sigma H3375
KCl Amresco O395
KH2PO4 USBiological P5110
Leibovitz's L-15 Medium Gibco 21083027
MgCl2 Sigma M8266
MgSO4 USBiological M2090
Na2HPO4·7H2O USBiological S5199
NaCl VWR X190
NaOCl (Bleach) Clorox
Penicillin-Streptomicen Fisher Scientific 15140122
Pronase E Sigma 7433 protease mixture from Streptomyces griseus
SDS Amresco O227
SMT1-FLQC fluorescence stereomicroscope Tritech Research
Sucrose USBiological S8010

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Citer Cet Article
Single Cell Dissociation of Caenorhabditis elegans: A Method to Isolate Live Cells. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20135, doi: (2023).

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