Questo video descrive un metodo per sezionare le gonadi degli ermafroditi C. elegans adulti, con conseguente soluzione di tessuti adatti all’immunosocienza e all’imaging fluorescente.
Protocol
Questo protocollo è un estratto da Gervaise e Arur, Analisi spaziale e temporale dell’ERK attiva nella linea germinale C. elegans . J. Vis. Exp. (2016). 1. Dissezione di vermi adulti per ottenere gonadi Scegliere 100 – 150 WT (N2) o genotipo desiderato di vermi nella fase di sviluppo desiderata e specifica (L1, L2, L3, L4, adulto, …
Materials
Flat bottom glass watch dish
Agar Scientific
AGL4161
We use glass because dissected gonads often stick to plastic
25 G needles
BD PrecisionGlide
305122
Syringes (could be 1 or 5 mL)
BD Syringes
1 mL: BD 309659
Microscope slides (25 x 75 x 1.0 mm)
Fisherbrand
12-550-343
Clinical bench top centrifuge
*M9 solution
Levamisole
Sigma
L9756
*M9 Buffer Recipe
3 g KH2PO4, 6 g Na2HPO4, 5 g NaCl, 1 mL 1 M MgSO4, H2O to 1 L.