Это видео описывает метод, чтобы вскрыть гонады от взрослых C. elegans гермафродитов, в результате чего ткани, которые подходят для иммуностиминга и флуоресцентной визуализации.
Protocol
Этот протокол является выдержкой из Gervaise и Arur, пространственного и временного анализа активного ERK в C. elegans Germline. J. Vis. Exp. (2016). 1. Рассечение взрослых червей для получения гонад Выберите…
Materials
Flat bottom glass watch dish
Agar Scientific
AGL4161
We use glass because dissected gonads often stick to plastic
25 G needles
BD PrecisionGlide
305122
Syringes (could be 1 or 5 mL)
BD Syringes
1 mL: BD 309659
Microscope slides (25 x 75 x 1.0 mm)
Fisherbrand
12-550-343
Clinical bench top centrifuge
*M9 solution
Levamisole
Sigma
L9756
*M9 Buffer Recipe
3 g KH2PO4, 6 g Na2HPO4, 5 g NaCl, 1 mL 1 M MgSO4, H2O to 1 L.