Cette vidéo décrit une méthode pour disséquer les oisons des hermaphrodites adultes de C. elegans, ayant pour résultat des tissus qui conviennent à l’immunostaining et à l’imagerie fluorescente.
Protocol
Ce protocole est un extrait de Gervaise and Arur, Spatial and Temporal Analysis of Active ERK in the C. elegans Germline. J. Vis. Exp. (2016). 1. Dissection des vers adultes pour l’obtention de 9ds Choisissez 100 à 150 WT (N2) ou le génotype désiré de vers au stade de développement désiré et spécifique (L1, L2, L3, L4, adu…
Materials
Flat bottom glass watch dish
Agar Scientific
AGL4161
We use glass because dissected gonads often stick to plastic
25 G needles
BD PrecisionGlide
305122
Syringes (could be 1 or 5 mL)
BD Syringes
1 mL: BD 309659
Microscope slides (25 x 75 x 1.0 mm)
Fisherbrand
12-550-343
Clinical bench top centrifuge
*M9 solution
Levamisole
Sigma
L9756
*M9 Buffer Recipe
3 g KH2PO4, 6 g Na2HPO4, 5 g NaCl, 1 mL 1 M MgSO4, H2O to 1 L.