Deze video beschrijft een methode om geslachtsklieren te ontleden van volwassen C. elegans hermafrodieten, wat resulteert in weefsels die geschikt zijn voor immunostaining en fluorescerende beeldvorming.
Protocol
Dit protocol is een uittreksel uit Gervaise en Arur, Spatial and Temporal Analysis of Active ERK in the C. elegans Germline. J.Vis. Exp. (2016). 1. Dissectie van volwassen wormen voor het verkrijgen van geslachtsklieren Kies 100 – 150 WT (N2) of het gewenste genotype wormen in de gewenste en specifieke ontwikkelingsfase (L1, L2, L3,…
Materials
Flat bottom glass watch dish
Agar Scientific
AGL4161
We use glass because dissected gonads often stick to plastic
25 G needles
BD PrecisionGlide
305122
Syringes (could be 1 or 5 mL)
BD Syringes
1 mL: BD 309659
Microscope slides (25 x 75 x 1.0 mm)
Fisherbrand
12-550-343
Clinical bench top centrifuge
*M9 solution
Levamisole
Sigma
L9756
*M9 Buffer Recipe
3 g KH2PO4, 6 g Na2HPO4, 5 g NaCl, 1 mL 1 M MgSO4, H2O to 1 L.