Мы описываем штраф рассечение стоматогастральных нервной системы из желудка американский омар (<i> Homarus атепсапиз</i>).
С целью понимания того, как нервная система производит деятельность и реагировать на окружающую среду, неврологи обратиться к модельных систем, которые проявляют активность интерес и являются доступными и поддаются экспериментальных методов. Стоматогастральных нервной системы (ст.) американского омара (<i> Homarus атепсапиз</i>; Также знаем, был Атлантический или омаров штата Мэн) был создан в качестве модельной системы для изучения ритма создания сетей и нейромодуляции сетей. Ст. состоит из 3 передних ганглиев (2 спаечный ганглиев и ганглиев пищевода), содержащие нейроны модулирующей этот проект централизованно стоматогастральных ганглии (STG). STG содержит около 30 нейронов, которые состоят из двух центральных шаблон генерации сетей, пилорический и желудка сети, которые лежат в основе поведения в кормление ракообразных<sup> 1,2</sup>. Хотя вполне возможно, для изучения этой системы<i> В естественных условиях</i<sup> 3</sup> Ст. продолжает производить ее ритмической активности, когда изолированных<i> В пробирке</i>. Физическая изоляция ст. в блюдо обеспечивает легкий доступ к somata в ганглиях для внутриклеточных электрофизиологических записей и нервы ст. для внеклеточных записей. Изоляция ст. состоит из двух этапов. Первая часть, рассекая желудка от животных, описано в сопровождающей статье видео<sup> 4</sup>. В этом видео статьи, прекрасно методы вскрытия используются для изоляции ст. из желудка. Эта процедура приводит к нервной системы подготовки, которая доступна для электрофизиологических записей.
Анатомия желудка омаров и ст. была хорошо описана ранее 5,6, и вариации этой процедуры вскрытия были использованы в многочисленных исследованиях. Мы рекомендуем ознакомления с анатомией желудке 5-7 и 5,8 ст. до начала вскрытия. Такое знакомство приведет к снижению риска случайного повреждения нервов и тканей.
Для поддержания здоровья подготовки, очень важно для поддержания препарата при прохладной температуре. Это легко достигается путем обмена солевой каждые 30 минут с 4 ˚ C солевой хранить в холодильнике. При погружении в холодную физиологическим раствором, изолированных подготовки ст. является жизнеспособным в течение многих часов. Записи в смежных гаммарус Homarus продемонстрировали стабильный ритмической активности СТГ на протяжении 5 дней в пробирке 9; аналогичные надежности был замечен в H. атепсапиз (чел. набл.).
Модуляторных вклад в STG от спаечный ганглиев требуется сохранить текущие модели двигателя. Поэтому для поддержания нормальной ритмической активности этих ганглиев и ионов, сын, и STN нервы должны быть сохранены. Рассечение мы опишем несколько сохраняет нервы двигателя (содержащих аксонов двигательных нейронов): AGN с (содержащие желудка Милль (GM) аксонов), MVN с (содержащие Боковые желудка (LG) и Нижний Сердечная (IC) аксонов), pyn с (содержащий пилорического нейрона (PY) аксонов), ПДН с (содержащие пилорического Расширитель (PD) аксонов), а ЛВН с (содержащие Боковые пилорического (LP), медиальная желудка (МГ), сжиженный нефтяной газ аксонов, а также от GM, П. Д. и П.). По вскрытии дополнительный (или другой) нервов, других двигательных нейронов аксоны могут быть записаны. Каждый отдельный тип аксонов двигательных нейронов могут быть записаны в отдельности анализируя и записи с нерва, иннервирующих мышцы, к которым типа проектов нейрона.
Этот препарат может быть использован для различных исследований сосредоточена на функции нервной системы. Активность нейронов может быть записан либо с помощью внутриклеточных, острые записи электрода от somata или аксонов, или путем регистрации электрических импульсов внеклеточно от нервов. Многие ионные каналы в нейронах STG были частично клонированы и мРНК может быть измерена с вручную вытащил somata 10,11.
Мы хотели бы поблагодарить нашего консультанта, доктора Евы Мардер. Это исследование было поддержано Национальным институтом здравоохранения грантов NS17813 Еве Мардер и NS059255 А. Е. Т.
Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
---|---|---|---|---|
Fine Tungsten Wire (0.001 in. diameter) | Tool | California Fine Wire | Cut into 1-2mm pieces to use as fine pins. | |
Forceps #5 | Tool | FST | 91150-20 | |
Minuten Pins | Tool | FST | 26002-10 | |
Moria Spring Scissors (7mm blades) | Tool | FST | 15370-52 | These are the top of the line. There are more economical spring scissors available from the same company. |
Petri Dish (100x15mm) | Tool | Fischer | 08-757-12 | Fill 2-4mm with Sylgard 182. |
Sylgard 182 | Other | Dow Corning | 182 | |
Pin Holder | Tool | FST | 26018-17 | Optional. Desheathing can be done with scissors and fine forceps alone. |
Super fine forceps #5SF | Tool | FST | 11252-00 | |
Tungsten Needles | Tool | FST | 10130-05 | Optional. Desheathing can be done with scissors or with pins cut from fine tungsten wire. |
Dissection microscope |