In vitro-odling är en direkt detektionsmetod för närvaro av levande bakterier. Detta protokoll beskriver metoder för odling av olika Borrelia spiroketer, inklusive de av Borrelia burgdorferi sensu lato-komplexet, återfallsfeber Borrelia-arter och Borrelia miyamotoi. Dessa arter är kräsna och långsamt växande men kan odlas.