La culture in vitro est une méthode de détection directe de la présence de bactéries vivantes. Ce protocole décrit les méthodes de culture de divers spirochètes de Borrelia, y compris ceux du complexe Borrelia burgdorferi sensu lato, de la fièvre récurrente des espèces de Borrelia et de Borrelia miyamotoi. Ces espèces sont méticuleuses et à croissance lente, mais peuvent être cultivées.