इन विट्रो कल्चर जीवित बैक्टीरिया की उपस्थिति के लिए एक प्रत्यक्ष पहचान विधि है। यह प्रोटोकॉल विविध बोरेलिया स्पाइरोकेट्स की संस्कृति के तरीकों का वर्णन करता है, जिसमें बोरेलिया बर्गडोर्फरी सेंसु लाटो कॉम्प्लेक्स, रिलैप्सिंग फीवर बोरेलिया प्रजातियां और बोरेलिया मियामोटोई शामिल हैं। ये प्रजातियां तेजी से और धीमी गति से बढ़ रही हैं लेकिन सुसंस्कृत हो सकती हैं।