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Bioquímica
/
从哺乳动物细胞中纯化泛素化p53蛋白
JoVE Revista
Bioquímica
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JoVE Revista
Bioquímica
Purification of Ubiquitinated p53 Proteins from Mammalian Cells
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从哺乳动物细胞中纯化泛素化p53蛋白
DOI:
10.3791/63602-v
•
10:55 min
•
March 21, 2022
•
Di Wu
,
Mengfan He
,
Dawei Li
1
Center for Translational Medicine
,
The Affiliated Zhangjiagang Hospital of Soochow University
Capítulos
00:05
Introduction
00:43
Plasmid Transfection
02:16
Cell Collection
02:52
Purification of Ubiquitinated Proteins under Nondenaturing Conditions
05:01
Purification of Ubiquitinated Proteins under Denaturing Conditions
07:49
Detection of Purified Ubiquitinated Proteins by Western Blotting
08:29
Results: Ubiquitinated p53 Proteins Purified under Nondenaturing and Denaturing Conditions
10:22
Conclusion
Summary
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该协议描述了一种以p53肿瘤抑制蛋白为例从哺乳动物细胞中纯化泛素蛋白的分步方法。泛素化的p53蛋白在严格的非变性和变性条件下从细胞中纯化。
Tags
Ubiquitinated P53
Protein Purification
Mammalian Cells
Ubiquitination
Liposome Transfection
MG132
FLAG Lysis Buffer
Protease Inhibitor
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