Journal
/
Genética
/
Применение ИНТЕРФЕРЕНЦИИ CRISPR (CRISPRi) для глушения генов у патогенных видов лептоспир
JoVE Revista
Genética
Author Produced
This content is Free Access.
JoVE Revista Genética
Application of CRISPR Interference (CRISPRi) for Gene Silencing in Pathogenic Species of Leptospira
Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

Применение ИНТЕРФЕРЕНЦИИ CRISPR (CRISPRi) для глушения генов у патогенных видов лептоспир

DOI:
10.3791/62631-v

•

14:49 min

•

August 14, 2021

•

, , ,
1Infectious Bacterial Diseases Research Unit, National Animal Disease Center, Agricultural Research Service,United States Department of Agriculture, 2Laboratório de Desenvolvimento de Vacinas,Instituto Butantan

Capítulos

  • 00:04Introduction
  • 02:56Protospacer Definition and Plasmid Construction
  • 04:24Leptospira Transformation by Conjugation
  • 09:35Colony Selection and Transconjugant Growth and Validation
  • 13:01Representative Results
  • 13:51Conclusions

Summary

Traducción Automática

Traducción Automática

Здесь описано применение ИНТЕРФЕРЕНЦИИ CRISPR (CRISPRi) для специфического глушения генов у видов Leptospira. Клетки лептоспир трансформируются путем конъюгации с плазмидами, экспрессирующими dCas9 (каталитически «мертвый» Cas9) и однонаправленной РНК (sgRNA), отвечающей за спаривание оснований с желаемой геномной мишенью. Представлены методы валидации глушения генов.

Tags

CRISPR InterferenceCRISPRiGene SilencingLeptospiraPathogenic SpeciesHornsby-Alt-Nally MediaLeptospirosisGenetic ToolsDCas9Single-guide RNAIn Vitro ResearchVaccine Development

Article

Embed

Añadir a la lista de reproducción

Usage Statistics

Videos relacionados

Отборочное и независимое генерирование CRISPR / Cas9-опосредованных генов-нокаутов в клетках млекопитающих

Стандартная методология для изучения на месте мутагенность как функция Точечная мутация ремонта, катализируемые ТРИФОСФАТЫ/Cas9 и SsODN в клетках человека

Микроинъекции ТРИФОСФАТЫ/Cas9 белка в канал сома, сомик punctatus, эмбрионы для редактирования гена

Протокол для производства интеграза недостаточным лентивирусные векторы для ТРИФОСФАТЫ/Cas9-опосредованной нокаут генов в делящихся клетках

Производства и очистки бакуловирусы для применения генной терапии

Высокоэффективные гена срыв мышиных и человека гемопоэтических предшественников клеток ТРИФОСФАТЫ/Cas9

ТРИФОСФАТЫ опосредованной реорганизация структуры хроматина цикла

ТРИФОСФАТЫ/Cas9 гена редактирования чтобы сделать условное мутантов из человека малярийного паразита P. falciparum

Рассечение Enhancer функции мультиплексной основанный ТРИФОСФАТЫ Enhancer вмешательства в клеточных линиях

Экспрессирующих длиной некодирующих РНК с помощью активации генов ТРИФОСФАТЫ

Read Article