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근접-리깅-분석기 사용 이체 유체 전단 응력 조건 하에서 TGFβ/BMP/SMAD 신호의 시각화 및 정량화

JoVE Revista
Bioquímica

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Visualization and Quantification of TGFβ/BMP/SMAD Signaling under Different Fluid Shear Stress Conditions using Proximity-Ligation-Assay

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근접-리깅-분석기 사용 이체 유체 전단 응력 조건 하에서 TGFβ/BMP/SMAD 신호의 시각화 및 정량화

DOI:

10.3791/62608-v

•

11:38 min

•

September 14, 2021

•

Paul-Lennard Mendez², Leon Obendorf, Petra Knaus

¹Institute for Chemistry and Biochemistry,Freie Universität Berlin, ²International Max-Planck Research School for Biology and Computation

Capítulos

00:05Introduction
00:40Cell Culture and Fluid Shear Stress Exposure
02:55Fixation
04:58Blocking and Incubation with Primary Antibody
06:28Incubation with PLA Probe and Ligation
07:34Amplification and Mounting
09:14Results: Effect of Shear Stress on the SMAD Protein Interactions
11:02Conclusion

Summary

Traducción Automática

여기서, 병리학및 생리학적 유체 전단 응력 조건에 노출된 내피 세포에서 근접 계각 분석(PLA)을 사용하여 여러 SMAD 복합체를 동시에 시각화하고 분석하는 프로토콜을 수립합니다.

Tags

Keywords: TGF-β/BMP/SMAD Signaling Proximity Ligation Assay Fluid Shear Stress Microfluidic Flow Channels HUVEC Cells Transcription Factor Complexes Vascular Biology

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