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Introduzione di mutazioni puntiformi nelle cellule staminali pluripotenti umane utilizzando l'editing del genoma senza soluzione di continuità
JoVE Revista
Genética
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Introducing Point Mutations into Human Pluripotent Stem Cells Using Seamless Genome Editing
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Introduzione di mutazioni puntiformi nelle cellule staminali pluripotenti umane utilizzando l'editing del genoma senza soluzione di continuità

DOI:
10.3791/61152-v

•

09:03 min

•

May 10, 2020

•

, ,
1MRC Centre for Regenerative Medicine,University of Edinburgh

Capítulos

  • 00:05Introduction
  • 00:40Gene Editing of Human Pluripotent Stem Cells
  • 06:57Results: Genetic Editing in Human Pluripotent Stem Cells
  • 08:06Conclusion

Summary

Traducción Automática

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Qui, descriviamo un metodo dettagliato per l'editing genetico senza soluzione di continuità nelle cellule staminali pluripotenti umane utilizzando un plasmide donatore basato su piggyBac e il mutante nickase Cas9. Due mutazioni puntiformi sono state introdotte nell'esone 8 del locus del fattore nucleare 4 alfa (HNF4α) degli epatociti nelle cellule staminali embrionali umane (hESC).

Tags

Human Pluripotent Stem CellsGenome EditingCRISPR-Cas9Seamless Genome EditingTargeted Gene InsertionLaminin 521MTeSR1 MediumCell DissociationNucleofectionSingle Guide RNATargeting Vector

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