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Knockdown estável de genes codificando proteínas matrizes extracelulares na linha célula do mioblasto C2C12 usando pequeno-hairpin (sh)RNA
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Stable Knockdown of Genes Encoding Extracellular Matrix Proteins in the C2C12 Myoblast Cell Line Using Small-Hairpin (sh)RNA

Knockdown estável de genes codificando proteínas matrizes extracelulares na linha célula do mioblasto C2C12 usando pequeno-hairpin (sh)RNA

DOI:
10.3791/60824-v

•

12:19 min

•

February 12, 2020

•

, ,
1Orthopaedic Research Laboratories, Leni & Peter W. May Department of Orthopaedics,Icahn School of Medicine at Mount Sinai

Capítulos

  • 00:04Introduction
  • 00:55C2C12 Transfection
  • 02:35Transfected C2C12 Selection
  • 03:15C2C12 Differentiation
  • 03:59Phenotypic Analysis
  • 06:10Western Blot Analysis Sample Preparation
  • 09:37Results: Representative C2C12 Selection, Differentiation, and Knockdown Validation
  • 11:19Conclusion

Summary

Traducción Automática

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Fornecemos um protocolo para derrubar genes que codificam proteínas de matriz extracelular (ECM) em mioblastos C2C12 usando rNA de pino pequeno (sh). Visando o ADAMTSL2 como exemplo, descrevemos os métodos para a validação da eficiência de knockdown no nível mRNA, proteína e celular durante o mioblasto C2C12 à diferenciação do miotubo.

Tags

Keywords: C2C12 MyoblastShRNAGene KnockdownExtracellular Matrix ProteinsStable Cell LineTransfectionPuromycin SelectionCell CultureMyotube Formation

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