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सी2C12 Myoblast सेल लाइन में एक्स्ट्रासेलुलर मैट्रिक्स प्रोटीन एन्कोडिंग जीन का स्थिर नॉकडाउन छोटे हेयरपिन (एसएच) आरएनए का उपयोग कर
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Stable Knockdown of Genes Encoding Extracellular Matrix Proteins in the C2C12 Myoblast Cell Line Using Small-Hairpin (sh)RNA
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सी2C12 Myoblast सेल लाइन में एक्स्ट्रासेलुलर मैट्रिक्स प्रोटीन एन्कोडिंग जीन का स्थिर नॉकडाउन छोटे हेयरपिन (एसएच) आरएनए का उपयोग कर

DOI:
10.3791/60824-v

•

12:19 min

•

February 12, 2020

•

, ,
1Orthopaedic Research Laboratories, Leni & Peter W. May Department of Orthopaedics,Icahn School of Medicine at Mount Sinai

Capítulos

  • 00:04Introduction
  • 00:55C2C12 Transfection
  • 02:35Transfected C2C12 Selection
  • 03:15C2C12 Differentiation
  • 03:59Phenotypic Analysis
  • 06:10Western Blot Analysis Sample Preparation
  • 09:37Results: Representative C2C12 Selection, Differentiation, and Knockdown Validation
  • 11:19Conclusion

Summary

Traducción Automática

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हम छोटे हेयरपिन (श) आरएनए का उपयोग करके C2C12 मायोब्लास्ट में एक्स्ट्रासेलुलर मैट्रिक्स (ईसीएम) प्रोटीन को एन्कोडिंग करने वाले जीन को स्थिर रूप से नीचे गिराने के लिए एक प्रोटोकॉल प्रदान करते हैं। एक उदाहरण के रूप में ADAMTSL2 को लक्षित करते हुए, हम C2C12 myoblast के दौरान mRNA, प्रोटीन और सेलुलर स्तर पर नॉकडाउन दक्षता के सत्यापन के तरीकों का वर्णन मायोट्यूब भेदभाव के लिए ।

Tags

Keywords: C2C12 MyoblastShRNAGene KnockdownExtracellular Matrix ProteinsStable Cell LineTransfectionPuromycin SelectionCell CultureMyotube Formation

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