NMR-Based Activity Assays for Determining Compound Inhibition, IC<sub>50</sub> Values, Artifactual Activity, and Whole-Cell Activity of Nucleoside Ribohydrolases

Brian J. Stockman; Abinash Kaur; Julia  K. Persaud; Maham Mahmood; Samantha  F. Thuilot; Melissa  B. Emilcar; Madison Canestrari; Juliana  A. Gonzalez; Shannon Auletta; Vital Sapojnikov; Wagma Caravan; Samantha  N. Muellers

doi:10.3791/59928

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Quimica

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化合物阻害、IC50値、アーティフィファクト活性、ヌクレオシドリボヒドロラーゼの全細胞活性を決定するためのNMRベース活性アッセイ

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NMR-Based Activity Assays for Determining Compound Inhibition, IC₅₀ Values, Artifactual Activity, and Whole-Cell Activity of Nucleoside Ribohydrolases

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化合物阻害、IC50値、アーティフィファクト活性、ヌクレオシドリボヒドロラーゼの全細胞活性を決定するためのNMRベース活性アッセイ

DOI:

10.3791/59928-v

•

10:24 min

•

June 30, 2019

•

Brian J. Stockman, Abinash Kaur, Julia K. Persaud, Maham Mahmood, Samantha F. Thuilot, Melissa B. Emilcar, Madison Canestrari, Juliana A. Gonzalez, Shannon Auletta, Vital Sapojnikov, Wagma Caravan², Samantha N. Muellers³

¹Department of Chemistry,Adelphi University, ²Department of Chemistry,Washington University in St. Louis, ³Department of Chemistry,Boston University

Capítulos

00:04Título
00:59Initial Test Compound Assay
05:01Detergent Counter Screen Assay
06:19Jump-Dilution Counter Screen Assays
07:56Results: Representative Nuclear Magnetic Resonance (NMR)-Based Assay Results
09:28Conclusion

Summary

Traducción Automática

NMRベースの活性アッセイは、2つのヌクレオシドリボヒドロラーゼ酵素の阻害剤を同定し、特徴付けるために開発された。プロトコルは、500 μMおよび250 μMの初期化合物アッセイ、IC₅₀値を決定するための用量応答アッセイ、洗剤カウンタースクリーンアッセイ、ジャンプ希釈カウンタースクリーンアッセイ、および大腸菌全細胞のアッセイのために提供されます。

化合物阻害、IC50値、アーティフィファクト活性、ヌクレオシドリボヒドロラーゼの全細胞活性を決定するためのNMRベース活性アッセイ

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