Journal
/
Bioquímica
/
Generasjon av innfødte, ukodede Huntingtin Exon1 Monomer og Fibrils bruker en SUMO Fusion strategi
JoVE Revista
Bioquímica
This content is Free Access.
JoVE Revista Bioquímica
Generation of Native, Untagged Huntingtin Exon1 Monomer and Fibrils Using a SUMO Fusion Strategy

Generasjon av innfødte, ukodede Huntingtin Exon1 Monomer og Fibrils bruker en SUMO Fusion strategi

DOI:
10.3791/57506-v

•

11:22 min

•

June 27, 2018

•

, , ,
1Laboratory of Molecular and Chemical Biology of Neurodegeneration,Ecole Polytechnique Fédérale de Lausanne (EPFL)

Capítulos

  • 00:04Título
  • 00:53Cell Lysis and Purification of His6-SUMO Httex1 Fusion Protein by Immobilized Metal Affinity Chromatography (IMAC)
  • 02:56Cleavage of the His6-SUMO-tag and HPLC Purification
  • 06:06Disaggregation and Resolubilization of Httex1 Proteins
  • 07:53Results: Characterization of Native, Untagged Huntingtin Exon1 Monomer and Fibrils Prepared via SUMO Fusion
  • 09:52Conclusion

Summary

Traducción Automática

Traducción Automática

Her presenterer vi en robust og optimalisert protokoll for produksjon av mg mengder innfødt, koden-ledig monomerer og fibrils av exon1 av Huntingtin protein (Httex1) basert på forbigående fusjon av små ubiquitin relaterte modifikator (SUMO).

Tags

Native Huntingtin Exon1SUMO Fusion StrategySDS-PAGE AnalysisIMAC PurificationHPLC PurificationDTTL-cysteineTrifluoroacetic AcidAggregation-prone ProteinsAmyloid-betaAlpha-synuclein

Article

Embed

Añadir a la lista de reproducción

Usage Statistics

Videos relacionados

Identifisering av lite molekyl bindende proteiner i en Native Cellular Miljø via Live-celle Photoaffinity Merking

Løse affinitetsrenset protein komplekser av Blå Native PAGE og Protein korrelasjon Profiling

Analysere superkomplekser av den mitokondriale elektrontransportkjede med innfødte elektroforese, in-gel-analyser og elektrolysering

Fraksjoneres for løsning av løselig og uløselig Huntingtin arter

Fangst og identifikasjon av RNA-bindende proteiner ved hjelp av Klikk kjemi-assistert RNA-interactome Capture (CARIC) strategi

Bruk av rekombinant Fusion proteiner i en fluorescerende Protease analysen plattform og deres i-gel-Renaturation

Hybrid Clear/Blue native elektroforese for separasjon og analyse av mitokondrie respiratory Chain Supercomplexes

En strategi for å identifisere forbindelser som påvirker Cell vekst og overlevelse i kultivert pattedyrceller ved lav-til-moderat gjennomstrømming

Lokalisering av SUMO-modifisert proteiner bruke fluorescerende Sumo-fangst proteiner

Interaksjoner med og membran Permeabilization av Brain mitokondrier av amyloid fibrils

Read Article