Modelo modificado de cirugía de lesión nerviosa preservada del dolor neuropático en ratones
Summary
La cirugía modificada es un método simplificado para el modelo de lesión nerviosa sin nervios en ratones o ratas que requiere solo una ligadura y un corte para lesionar los nervios peroneo y sural comunes.
Abstract
La lesión nerviosa salvada (SNI) es un modelo animal que imita los síntomas cardinales de la lesión nerviosa periférica para estudiar el mecanismo molecular y celular del dolor neuropático en ratones y ratas. Actualmente, existen dos tipos de modelo de SNI, uno para cortar y ligar el nervio peroneo común y los nervios tibiales con el nervio sural intacto, que se define como SNIs en este estudio, y otro para cortar y ligar el nervio peroneo común y el nervio sural con el nervio tibial intacto, que se define como SNIt en este estudio. Debido a que el nervio sural es puramente sensorial, mientras que el nervio tibial contiene fibras motoras y sensoriales, el modelo SNIt tiene un déficit motor mucho menor que el modelo SNI. En el modelo tradicional de ratón SNIt, los nervios peroneo común y sural se cortan y ligan por separado. Aquí se describe un método de cirugía SNIt modificado para dañar los nervios peroneo y sural comunes con una sola ligadura y un corte con un tiempo de procedimiento más corto, lo que es más fácil de realizar y reduce el riesgo potencial de estiramiento de los nervios ciático o tibial, y produce una hipersensibilidad mecánica similar al modelo SNIt tradicional.
Introduction
El dolor neuropático inducido por una lesión nerviosa después de una cirugía o un traumatismo tiene una carga económica significativa que afecta la calidad de vida. Se desarrollaron con éxito una gran cantidad de modelos de lesión nerviosa, incluyendo la ligadura del nervio espinal (SNL)1, la lesión crónica por constricción (ICC)2 del nervio ciático, la ligadura parcial del nervio ciático (pSNL)3, la transacción del nervio ciático (SNT)4 y la lesión del nervio preservado (SNI)5,6,7,8, para imitar los síntomas cardinales de la lesión de los nervios periféricos en ratas y ratones para estudiar el mecanismo molecular y celular de la lesión. Dolor neuropático 6,7,8,9,10. Sin embargo, cada modelo quirúrgico tiene sus beneficios y limitaciones, por lo que se debe prestar especial atención a la exploración y desarrollo de los modelos quirúrgicos10.
El modelo SNI en roedores produce hipersensibilidad a largo plazo a la estimulación mecánica. Sin embargo, es algo confuso porque hay dos modelos diferentes de SNI. El modelo inicial de SNI se desarrolló en el laboratorio de Woolf, en el que se lesionaron los nervios peroneo común y tibial, dejando intacto el nervio sural 5,6. El segundo modelo de SNI se desarrolló en el laboratorio de Basbaum, en el que se lesionaron los nervios peroneo común y sural, dejando intacto el nervio tibial 7,8. El modelo inicial de Woolf se define como SNIs aquí porque el nervio sural se deja intacto, y el modelo de Basbaum se define como SNIt aquí porque el nervio tibial se deja intacto. Debido a que el nervio sural es puramente sensorial, mientras que el nervio tibial contiene fibras motoras y sensoriales, el modelo SNIt tiene un déficit motor mucho menor que el modelo SNI. Sin embargo, a diferencia del modelo SNIs, los ratones en el modelo SNIt no desarrollan hipersensibilidad térmica, pero se desarrolla hipersensibilidad mecánica en ambos modelos. A pesar de que el modelo SNIt es un procedimiento relativamente fácil, requiere la ligadura de los nervios sural y peroneo común por separado, con el riesgo potencial de estiramiento de los nervios ciático o tibial 6,7,8,9.
Los nervios peroneo, tibial y sural comunes son tres ramas del nervio ciático y se pueden identificar claramente en el borde superior del músculo gastrocnemio (Figura 1): el nervio tibial pasa por debajo del músculo gastrocnemio, y el nervio peroneo común (lado cefálico) y el nervio sural (lado caudal) están por encima del músculo gastrocnemio11. Sobre la base de sus características anatómicas, se desarrolló un procedimiento de cirugía SNIt modificado en ratones para ligar los nervios peroneo y sural comunes junto con una sola ligadura de nervios y una corte de nervio, lo que resulta en un tiempo de procedimiento más corto.
Protocol
Representative Results
Discussion
En comparación con el método SNIt tradicional de ratón que liga el nervio peroneo común y el nervio sural por separado 6,7,8,9, el modelo SNIt modificado tiene tres ventajas: (1) tiene menos riesgo de contraer o estirar los nervios ciático o tibial; (2) No es necesario extirpar los muñones del nervio distal después del corte del nervio porque al ligar el…
Divulgaciones
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Z.G. cuenta con el apoyo de NINDS R01NS100801.
Materials
| 6-0 suture | Henry Schein | 9007482 | Nerve ligation and close the muscular layer |
| Iris Scissors | Integra Miltex | 12460598 | Cut muscle and fascia |
| Mayo dissecting scissors | Fisherbrand | 895120 | Cut skin incision |
| Micro forcep | Fisherbrand | 16100110 | Blunt dissection biceps femoris muscle |
| Micro Scissors | Excelta | 17467496 | Cut nerve |
| Microdissection Forceps | Fisherbrand | 16100123 | Separate the common peroneal and the sural nerves from the neighboring tissues |
| Needle Holder | Fisherbrand | 8966 | Hold 6-0 needle |
| Prism software | Graph Pad | version 8.0 | Statistical analysis software |
| Wound clips | Roboz Surgical | NC1878744 | Close skin incision |
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