Summary

Aerosol örnekleme için yeni bir taşınabilir Vitro pozlama kaset

Published: February 22, 2019
doi:

Summary

Burada, taşınabilir hücresel aerosol Etkilenmeler gerçekleştirmek ve hücre tepkisini ölçmek için bir iletişim kuralı mevcut. Hücreleri, hava-sıvı arayüzü içinde vivo Fizyoloji taklit eden, yetiştirilen yöntemini kullanır. Bakır nanopartikül aerosoller için hücresel yanıt Reaktif oksijen türleri üretimi ve sitotoksisite laktat dehidrogenaz yayın olarak oksidatif stres olarak gözlendi.

Abstract

Bu iletişim kuralı, onun karakterizasyonu ve performans dahil olmak üzere yıpranmış olan yetenekli bir yeni vitro pozlama sistemi, tanıttı. Hava-sıvı arayüzey (ALI) vitro pozlama sistemleri çoğu kez büyük ve hantal, alan ve işlem kaynak emisyon veya nefes bölgedeki ulaşım zorlaştırır. Bu sistemler minyatür laboratuarda işlem zamanı hızlandırdığını ve hücreleri başvurmadan önce aerosol değiştirmez daha uygun bir pozlama yöntemi sağlayan alanına getirilebilir. Belgili tanımlık taşınabilir vitro pozlama kaset (PIVEC) geleneksel laboratuvar ayarı dışında test vitro toksisite için izin vermek için 37 mm filtre kaset uyum sağlar. PIVEC gravimetrik üzerinde dayalı ifade verimliliği belirlemek için bakır nano tanecikleri üç boyutu kullanarak karakterize edildi ve parçacık numara konsantrasyon analizi. İlk sitotoksisite deneyler hücre canlılığı koruyarak parçacıklar yatırmak için sistem yeteneklerini belirlemek için Açık akciğer hücreleri ile gerçekleştirilmiştir. PIVEC ne zaman kullanılabilir dikey akışı vitro pozlama cihazlar için karşılaştırma ifade benzer veya artan verimlilik sağlar. Alt örnek çıktı rağmen küçük boyutlu pozlama sistemleri geçerli vitro için ALI bazı avantajlar sağlamaktadır. Bunlar kişisel izlemek için giyilmelidir içerir, emisyon kaynağı ve kurulum seçeneğine laboratuvarından hareketlilik daha düşük bir kullanıcı korurken Uzaysal çözünürlük için birden fazla sistemi maliyet. PIVEC aerosoller alanında ve bir hava-sızdı, vitro modeli üzerine nefes bölgedeki toplama yeteneğine sahip bir sistemdir.

Introduction

Vitro teknikleri kullanarak kişisel örnekleme aerosoller işyerinde biyolojik etkileri ile ilgili kapsamlı bilgi sağlayabilir. 1 Etkilenmeler havadaki kirleticiler için Etkilenmeler kimyasal kendisi, gaz aralıklı Etkilenmeler bir aygıtı gibi bir rock’çı, veya doğrudan kullanarak hücre süspansiyon için nerede tanıttı batık koşullar altında toplanan hava örnekleri için içerir. Etkilenmeler vasıl hava-sıvı arayüzey (ALI). 2 bu tekniklerin çoğu askıya alınması veya örnekleri her biri toksikolojik çalışma aerosol potansiyel değişiklikleri nedeniyle etkileyebilir maruz kalma önce topluluğu yetiştirilen hücreleri ile gerçekleştirilir. 3 bu değişiklikleri önlemek için laboratuvar birkaç vitro kullanarak alana literatürde,4,5,6,7kullanılan ALI kültür pozlama sistemleri getirilebilir, 8,9,10,11,12,13 ancak birkaç ticari olarak kullanılabilir. 8 , 9 , 12 bu sistemleri özellikle sıcaklık ve nem hücresel ortamı ve örnek aerosol debisi düzenleyen aletleri dahil olmak üzere hantal, çoğu kez. PIVEC kullanarak, aerosol Etkilenmeler dışında bir geleneksel laboratuvar ayarı veya nefes bölgedeki inhalasyon koşulları taklit ederken gerçekleştirilebilir.

Aerosol ifade vitro belirlenmesi sağlık etkileri nedeniyle inhalasyon incelenmesi için önemlidir. Nefes Bölge alanı içinde ağız ve burun,14 30 cm nano tanecikleri maruz anlamak için ve akciğerlerde biyolojik etkileri bağlantı için çok önemlidir. 2 kez, üzerine yatırılır ve sistem6,15 ‘ e veya aynı miktarda toplu olarak yönetilen parçacıklar bölünen hücreleri tarafından alınan parçacıklar bir ifade verimliliği ifade hücreleri üzerinde tanımlanır. 4 , 16 aerosoller nefes bölgedeki ölçmek için geçerli temel parçacıkların bir verilen örnekleme süre içinde yakalama ve daha fazla test yapmak için filtreleri kullanarak filtre yöntemlerdir. 17 kişisel gözlem daha az örnekleri bedeli ile gelir küçük bir sistem gerektirir.

Sağlık etkileri maruz kalmaya karşı bir aerosol belirlemek için pek çok yaklaşım vardır. ALI modeli olduğu gibi bir gerçek pozlama senaryo havada hücrelere doğrudan yönetilecek aerosol olanak sağlar ancak daha düşük maliyetli ve hava-sıvı engelleri gözleri gibi taklit ederken vivo içinde daha az zaman yoğun çalışmalar, deri ve akciğer. Akciğer hücreleri ALI yetiştirilen bir polarize bariyer tabaka, belirgin bir mukus ve yüzey aktif üretim dahil içinde vivo akciğer epitel benzer fiziksel özellikler üreten18,19 oluşturma yeteneği var bronş veya alveolar hücre hatları, dayak,19 sıkı kavşaklar,19,20 ve hücre polarizasyon kirpikler. 18 bunlar toksisite araştırmaları ölçülen hücresel yanıt etkileyebilir gibi değiştirir. 21 Ayrıca, ALI vitro modeli via süspansiyon modelleri22 kez daha fazla duyarlı hücreler daha maruz vardır ve mümkün olan modeli akut vivo içinde Soluma Toksisitesi için sonuçlar. 23 , 24 bu nedenle, doğal bir sonraki adım ise nefes bölgedeki ölçülerini gerçekleştirebilir bir ALI pozlama sistemi var.

Aerosol emisyon kaynağında doğrudan hücrelere teşhir ederek soruşturma tüm gazlar, yarı uçucu bileşikler ve parçacıklar karışımı dahil etkileri ortaya çıkar. Karışımı bir filtre üzerinde toplanır, gazlar ve uçucu bileşikler değil yakalanır ve tüm karışımı araştırıldı. Buna ek olarak, bir toz veya sıvı süspansiyon parçacıkların sulandırma toplama veya sıvı süspansiyon dağılması gibi parçacık-sıvı etkileşimleri yol açabilir. 25 , 26 aerosol parçacıkları sıvıya eklendiğinde orada olur Aglomerasyon,25,27 oluşumu bir protein corona,28 veya ifade etkileyebilir sıvı bileşikler ile etkileşim için daha yüksek bir potansiyeli ve biyolojik yanıt etkisi. 29 , 30

Pozlama, ALI üç ana aerosol profilleri, bulut halledilmesi, paralel akış ve dikey akışı dayanmaktadır. Yerleşme, hava-sıvı arayüzey hücre pozlama (ALICE) tarafından kullanılan bulut,4 toplu sistem nerede çekim ve diffusional aerosol tek bir birim olarak kabul edilir gibi yerleşme parçacıklar mevduat. Paralel akış, elektrostatik sprey vitro pozlama sistemi (SAÇAK)5 ve Multiculture maruz kalma Odası (MEC) II, tarafından kullanılan6 , Albert hareket akışı profilinden aracılığıyla ifade sağlar. Bir microsprayer,7 Nano Aerosol odası In-Vitro toksisite (NACIVT),11 ve ticari ALI sistemleri8,9,10,12, tarafından kullanılan dikey akışı sıkışması, ekler parçacıklar ifade bölgesi içinde. Bu pozlama sistemleri büyük ve hantal, aşırı sistemleri, Merkezi Klima pompalar akışının, önceden veya bile salonları kuluçka hücre için Isıtma aerosol için gerektiren çoğu. Bu büyük boy sistem taşınabilirliği azalır. Emisyon kaynağında doğrudan örnekleme yerine bu sistemler genellikle çözümleme için oluşturulan laboratuvar veya modeli aerosoller getirdi örnekleri var. Verilmiş aerosol karmaşıklığı laboratuvar alanından çeviri kayıp. PIVEC mevcut sistemleri, bir dış yüzey alanı yaklaşık 460 cm2 ile daha küçük ve sadece 60 gram, ısı ve nem kontrolü ile sistemine son derece taşınabilir aygıt için izin dahil. Düşük boyut ve ağırlık sistemin yıpranmış ya da doğrudan örnekleme izin maruz kalma, kaynak için alınan izin verin.

Geçerli pozlama sistemleri büyük boyutunu da yetenek konsantrasyonlarda kayma degradeler araştırmak için örnekleme yapmak azaltır. Bu çözünürlük birçok potansiyel çevresel ve mesleki tehlikeler araç egzoz partikül madde veya işyeri faaliyetleri gibi toksikolojik etkileri belirlerken Kloroformu oluştuğu anahtarıdır. Hemen sonrası emisyon, parçacık konsantrasyonu kayma bir sapma olur. Bu zamanla parçacıklar boyunca atmosfer dağıtmak ve bu etkilerin değiştirebilirsiniz sürece sıcaklık, basınç, Rüzgar ve güneş gibi ortam koşullarına göre büyür. Parçacıklar yaş ve de bir kez verilmiş31,32 okside başlayabilirsiniz ve dağılım oranları ve topografya tarafından etkilenir; kanyonlar ve nerede dağılım etkileri yavaşladı ve düşük konsantrasyonlarda bulunur tünelleri, daha yüksek konsantrasyonlarda bulundu olduğu yerde dağılım için büyük bir alan. 33 bu değişiklikler dağılım oranlarında insan sağlığı üzerinde önemli etkileri olabilir ve astımlı yetişkin kentsel kırsal ayarlarında karşı yaşayan sayısı karşılaştırırken görülebilir. 34 birçok pozlama sistemi aynı anda birden fazla örnekleri sağlarken, birden fazla sistemi Uzaysal çözünürlük gerçekleştirmek için büyük ekipman bir bolluk ile gerek yoktur.

Laboratuar için alanının getirerek, analiz zaman bir sensör tüm cep telefonu kullanarak Azaltılabilecek. Bilinen biyolojik mekanizmaları ve bitiş noktaları aşağıdaki aerosol kompozisyon ve boyut olarak belirlenmesi yardımcı olabilir. Mucociliary gümrükleme, fagositoz ve translocation, gibi yavaş Temizleme yöntemleri nedeniyle bu parçacıklar kez hücrelerle yaklaşık üreten oksidatif stres, inflamasyon ve hatta hücre ölümü hafta3 gün boyunca etkileşim vardır. Biyolojik bu bitiş noktası için olumsuz sonuç yolları kardiyovasküler hastalık veya kronik obstrüktif akciğer hastalığı için başlangıç noktaları olabilir. Ayrıca, Wiemenn ve ark. vitro deneyleri için kısa vadeli vivo içinde Soluma Toksisitesi edebiyat değerlerle karşılaştırmak için bir dizi sergiledi. 35 Vivo yanıt iki sitotoksisite laktat dehidrogenaz yayın, oksidatif stres glutatyon azaltma ve hidrojen peroksit oluşumu ve yayın ve enflamasyon üzerinden potansiyel üzerinden test dört olumlu sonuçlar ile tahmin edilmiştir tümör nekroz faktör Alfa gen. Test on mikro metal oksitleri dışında altı olarak test etkin (titanyum oksit, çinko oksit ve dört farklı Seryum oksit) Etkilenmeler içinde vitro onay vivo içindeile kullanma. 

İş ortamında aerosoller etkilerini incelemek amacıyla, PIVEC alanındaki pozlama için laboratuarımızın geliştirdi. Ayrıca, PIVEC izlemek ve 37 mm filtre kaset36 gibi inhalasyon pozlama araştırmak kişisel örnekleme için takılabilir veya birden çok sistemi belirli bir alanı içinde Uzaysal çözünürlük elde etmek için kullanılabilir. Bu protokol için karakterizasyonu ve PIVEC kullanımı ele alınmıştır. Maruz kaldıktan sonra sitotoksisite deneyleri biyolojik etkileri gözlenmektedir.

Protocol

Operatörleri kişisel koruyucu ekipman (önlük, eldiven, gözlük) giymek gerekir ne zaman 1, 2, 3, 5 ve 6 numaralı adımları gerçekleştirme. 1. malzeme hazırlanması Sistem birleştirme ve pozlama tekrarlanabilirlik sağlamak malzemeleri hazırlayın. Kullanım yeni veya % 70 etanol temizlenmiş ¼” iç çap iletken borular ve ¼” dış çap bağlayıcıların sistem birleştirme için emin olun. Mağaza test materyalleri iyi denetimli b…

Representative Results

Mesleki vitro toksikoloji aerosol çekim yaparken hücresel canlılığı bakımı içerir. PIVEC sistem sıcaklık ve nem kontrolü ve yıpranmış PIVEC de dahil olmak üzere Şekil 2′ de gösterilmiştir. Sıcaklık pilli direnç ısıtıcı kullanarak devam edildi ve gözenekli, ıslak tüpünden doğal nemlendirme kullanarak nemlendirilmelidir aerosol arttı. Bir laboratuvar içinde ayarlama bir kontrollü aerosol şekil 1</…

Discussion

Filtre kaset aerosoller nefes bölgedeki toplama, basit, ucuz bir yöntem sağlar; Ancak, aerosol örnekleri filtrelerinden çıkarılan tüm aerosol (yani gazlar, tenler ve parçacıklar) temsil yapmak ve sonuç olarak ilgili biyolojik etkileri değerlendirilmesi sınırlamak. 37 mm filtre kaset ilk tasarım kullanarak, PIVEC taşınabilirliği korumak ve inhalasyon parçacıkları in vivo birikimi taklit etmek için tasarlanmıştır. PIVEC mevcut ALI pozlama sistemleri, yaklaşık olarak bir doku kutusu dahil…

Divulgaciones

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Yazarlar Boris Solomonov ve Virginia Commonwealth yenilik makinenin olduğu dükkanın hızlı prototipleme cihazı ile yardım için teşekkür etmek istiyorum. Yazarlar ayrıca Cristian Romero-Fuentes Lewinski grubunun, Dr Vitaliy Avrutin, Dr. Dmitry Pestov ve Virginia Commonwealth Nanomalzemeler çekirdek karakterizasyonu tesis onların yardım için parçacık karakterizasyonu teşekkür etmek istiyorum. Bu eser Dr Lewinski Virginia Commonwealth Üniversitesi’nde Mühendislik Fakültesi tarafından sağlanan başlangıç fonlar tarafından desteklenmiştir.

Materials

Scanning mobility particle sizer (SMPS) TSI, Inc. 3910 NanoSMPS
Optical particle sizer (OPS) TSI, Inc. 3330
Stainless Steel Pipe, 4" Long McMaster-Carr 4830K116 Standard-Wall 304/304L, Threaded on Both Ends, 1/8 Pipe Size
Brass Ball Valve with Lever Handle McMaster-Carr 4112T12 Compact High-Pressure Rating, 1/8 NPT Female
Steel Pipe, 2" Long McMaster-Carr 7753K121 Standard Wall, Threaded on One End, 1/8 Pipe Size
HEPA filter GE Healthcare 09-744-12 HEPA-Cap Disposable Air Filtration Capsule
Vacuum Generator PISCO USA VCH10-018C
PIVEC VCU For design please contact authors
Resistive heater
1/4" barbed connectors Zefon International, Inc. 459743
Porous tubing Scientific Commodities, Inc. BB2062-1814A Hydrophilic 10 um pores
Battery power bank
Cell culture insert Fisherbrand 353095 24 well plate insert
Filter Forceps Fisherbrand 09-753-50
Transfer Pipette ThermoScientific 13-711-27
Glass Fiber Filters SKC 225-7 Binder-Free Type AE Filter 37 MM 1.00 um pore
Ultra Micro Balance A&D BM-22 Housed in environmental chamber
37 mm filter cassette SKC 225-3250 Filter Cassette Blank, 37 mm, Clear Styrene
Variable flow vacuum pump SKC 220-5000TC AirChek TOUCH, 5 to 5000 mL/min
Copper Particles U.S. Research Materials, Inc. US1090 40 nm
Copper Particles U.S. Research Materials, Inc. US1088 100 nm
Copper Particles U.S. Research Materials, Inc. US1117M 800 nm

Referencias

  1. Lewinski, N. A., Secondo, L. E., Ferri, J. K. Enabling Real-Time Hazard Assessment at the Workplace Enabling Real-Time Hazard Assessment at the Workplace. 14th Global Congress on Process Safety. , 1-9 (2018).
  2. Bakand, S., Winder, C., Khalil, C., Hayes, A. Toxicity assessment of industrial chemicals and airborne contaminants: transition from in vivo to in vitro test methods: a review. Inhalation Toxicology. 17, 775-787 (2005).
  3. Bakand, S., Hayes, A. Troubleshooting methods for toxicity testing of airborne chemicals in vitro. Journal of Pharmacological and Toxicological Methods. 61 (2), 76-85 (2010).
  4. Lenz, A. G., et al. A dose-controlled system for air-liquid interface cell exposure and application to zinc oxide nanoparticles. Particle and Fibre Toxicology. 6, 32 (2009).
  5. de Bruijne, K., et al. Design and testing of Electrostatic Aerosol in Vitro Exposure System (EAVES): an alternative exposure system for particles. Inhalation Toxicology. 21, 91-101 (2009).
  6. Asimakopoulou, A., Daskalos, E., Lewinski, N., Riediker, M., Papaioannou, E., Konstandopoulos, A. G. Development of a dose-controlled multiculture cell exposure chamber for efficient delivery of airborne and engineered nanoparticles. Journal of Physics: Conference. 429, 1-10 (2013).
  7. Grigg, J., et al. DNA damage of macrophages at an air-tissue interface induced by metal nanoparticles Macrophage. Nanotoxicology. 3 (4), 348-354 (2009).
  8. Aufderheide, M., Knebel, J. W., Ritter, D. An improved in vitro model for testing the pulmonary toxicity of complex mixtures such as cigarette smoke. Experimental and Toxicologic Pathology. 55, 51-57 (2003).
  9. Aufderheide, M., Halter, B., Möhle, N., Hochrainer, D. The CULTEX RFS: A comprehensive technical approach for the in vitro exposure of airway epithelial cells to the particulate matter at the air-liquid interface. BioMed Research International. 2013 (1), 1-15 (2013).
  10. Tippe, A., Heinzmann, U., Roth, C. Deposition of fine and ultrafine aerosol particles during exposure at the air/cell interface. Journal of Aerosol Science. 33, 207-218 (2002).
  11. Savi, M., et al. A novel exposure system for the efficient and controlled deposition of aerosol particles onto cell cultures. Environmental Science and Technology. 42, 5667-5674 (2008).
  12. Fröhlich, E., et al. Comparison of two in vitro systems to assess cellular effects of nanoparticles-containing aerosols. Toxicology in Vitro. 27, 409-417 (2013).
  13. Frijns, E., et al. A Novel Exposure System Termed NAVETTA for in Vitro Laminar Flow Electrodeposition of Nanoaerosol and Evaluation of Immune Effects in Human Lung Reporter Cells. Environmental Science and Technology. 51 (9), 5259-5269 (2017).
  14. Vincent, J. H. . Aerosol Science for Industrial Hygienists. , (1995).
  15. Fujitani, Y., Sugaya, Y., Hashiguchi, M., Furuyama, A., Hirano, S., Takami, A. Particle deposition efficiency at air-liquid interface of a cell exposure chamber. Journal of Aerosol Science. 81, 90-99 (2015).
  16. Elihn, K., Cronholm, P., Karlsson, H. L., Midander, K., Odnevall Wallinder, I., Möller, L. Cellular Dose of Partly Soluble Cu Particle Aerosols at the Air-Liquid Interface Using an. In Vitro Lung Cell Exposure System. Journal of Aerosol Medicine and Pulmonary Drug Delivery. 26 (2), 84-93 (2013).
  17. . . Aerosols Handbook Measurement, Dosimetry, and Health Effects. , (2005).
  18. de Souza Carvalho, C., Daum, N., Lehr, C. M. Carrier interactions with the biological barriers of the lung: Advanced in vitro models and challenges for pulmonary drug delivery. Advanced Drug Delivery Reviews. 75, 129-140 (2014).
  19. Fattal, E., Grabowski, N., Mura, S., Vergnaud, J., Tsapis, N., Hillaireau, H. Lung Toxicity of Biodegradable Nanoparticles. Journal of Biomedical Nanotechnology. 10 (10), 2852-2864 (2014).
  20. Klein, S. G., Serchi, T., Hoffmann, L., Blömeke, B., Gutleb, A. C. An improved 3D tetraculture system mimicking the cellular organisation at the alveolar barrier to study the potential toxic effects of particles on the lung. Particle and Fibre Toxicology. 10, 31 (2013).
  21. Oberdörster, G., et al. Principles for characterizing the potential human health effects from exposure to nanomaterials: elements of a screening strategy. Particle and Fibre Toxicology. 2, 8 (2005).
  22. Secondo, L. E., Liu, N. J., Lewinski, N. A. Methodological considerations when conducting in vitro, air-liquid interface exposures to engineered nanoparticle aerosols. Critical Reviews in Toxicology. , 1-32 (2016).
  23. Sayes, C. M., Reed, K. L., Warheit, D. B. Assessing toxicology of fine and nanoparticles: Comparing in vitro measurements to in vivo pulmonary toxicity profiles. Toxicological Sciences. 97 (1), 163-180 (2007).
  24. Maier, K. L., et al. Health effects of ambient particulate matter–biological mechanisms and inflammatory responses to in vitro and in vivo particle exposures. Inhalation Toxicology. 20 (May 2007), 319-337 (2008).
  25. Cohen, J. M., Teeguarden, J. G., Demokritou, P. An integrated approach for the in vitro dosimetry of engineered nanomaterials. Particle and Fibre Toxicology. 11 (1), 20 (2014).
  26. Deloid, G., et al. Estimating the effective density of engineered nanomaterials for in vitro dosimetry. Nature Communications. 5, 3514 (2014).
  27. Pal, A. K., Bello, D., Cohen, J., Demokritou, P. Implications of in vitro dosimetry on toxicological ranking of low aspect ratio engineered nanomaterials. Nanotoxicology. , 1-15 (2015).
  28. Walkey, C., et al. Protein corona fingerprinting predicts the cellular interaction of gold and silver nanoparticles. ACS Nano. 8 (3), 2439-2455 (2014).
  29. Raemy, D. O., et al. Effects of flame made zinc oxide particles in human lung cells – a comparison of aerosol and suspension exposures. Particle and Fibre Toxicology. 9 (1), 33 (2012).
  30. Holder, A. L., Lucas, D., Goth-goldstein, R., Koshland, C. P. Cellular response to diesel exhaust particles strongly depends on the exposure method. Toxicological Sciences. 103 (1), 108-115 (2008).
  31. Sanderson, P., et al. Characterisation of iron-rich atmospheric submicrometre particles in the roadside environment. Atmospheric Environment. 140. , 167-175 (2016).
  32. Burtscher, H. Physical characterization of particulate emissions from diesel engines: A review. Journal of Aerosol Science. 36 (7), 896-932 (2005).
  33. Ris, C. U.S. EPA health assessment for diesel engine exhaust: a review. Inhalation Toxicology. 19 (Suppl. 1), 229-239 (2007).
  34. Jie, Y., Isa, Z. M., Jie, X., Ju, Z. L., Ismail, N. H. Urban vs. Rural Factors That Affect Adult Asthma. Reviews of Environmental Contamination and Toxicology. 226, (2013).
  35. Wiemann, M., Vennemann, A., Sauer, U. G., Wiench, K., Ma-Hock, L., Landsiedel, R. An in vitro alveolar macrophage assay for predicting the short-term inhalation toxicity of nanomaterials. Journal of Nanobiotechnology. 14 (1), 16 (2016).
  36. Kenny, L. C., et al. A collaborative european study of personal inhalable aerosol sampler performance. Annals of Occupational Hygiene. 41 (2), 135-153 (1997).
  37. Tiwari, A. J., Fields, C. G., Marr, L. C. A Cost-Effective Method of Aerosolizing Dry Powdered Nanoparticles. Aerosol Science and Technology. 47 (11), 1267-1275 (2013).
  38. Blank, F., Rothen-Rutishauser, B. M., Schurch, S., Gehr, P. An Optimized In Vitro Model of the Respiratory Tract Wall to Study Particle Cell Interactions. Journal of Aerosol Medicine. 19 (3), 392-405 (2006).
  39. Laboratory, N. C. . NCL Method GTA-2 HEP G2 Hepatocarcinoma Cytotoxicity Assay. (November), 1-9 (2015).
  40. Kim, J. S., Peters, T. M., O’Shaughnessy, P. T., Adamcakova-Dodd, A., Thorne, P. S. Validation of an in vitro exposure system for toxicity assessment of air-delivered nanomaterials. Toxicology in Vitro. 27 (1), 164-173 (2013).
  41. Mertes, P., et al. A compact and portable deposition chamber to study nanoparticles in air-exposed tissue. Journal of aerosol medicine and pulmonary drug delivery. 26, 228-235 (2013).
  42. Panas, A., et al. Silica nanoparticles are less toxic to human lung cells when deposited at the air-liquid interface compared to conventional submerged exposure. Beilstein Journal of Nanotechnology. 5, 1590-1602 (2014).
  43. Zavala, J., et al. Regulating temperature and relative humidity in air-liquid interface in vitro systems eliminates cytotoxicity resulting from control air exposures. Toxicology Research. 6, 448-459 (2017).
  44. Jing, X., Park, J. H., Peters, T. M., Thorne, P. S. Toxicity of copper oxide nanoparticles in lung epithelial cells exposed at the air – liquid interface compared with in vivo assessment. TOXICOLOGY IN VITRO. 29 (3), 502-511 (2015).
  45. Bitterle, E., et al. Dose-controlled exposure of A549 epithelial cells at the air-liquid interface to airborne ultrafine carbonaceous particles. Chemosphere. 65, 1784-1790 (2006).
  46. Steinritz, D., et al. Use of the Cultex Radial Flow System as an in vitro exposure method to assess acute pulmonary toxicity of fine dusts and nanoparticles with special focus on the intra- and inter-laboratory reproducibility. Chemico-Biological Interactions. 206 (3), 479-490 (2013).
  47. Cronholm, P., et al. Intracellular uptake and toxicity of Ag and CuO nanoparticles: A comparison between nanoparticles and their corresponding metal ions. Small. 9 (7), 970-982 (2013).
  48. Cronholm, P., Midander, K., Karlsson, H. L., Elihn, K., Wallinder, I. O., Möller, L. Effect of sonication and serum proteins on copper release from copper nanoparticles and the toxicity towards lung epithelial cells. Nanotoxicology. 5 (2), 269-281 (2011).
  49. Midander, K., et al. Surface characteristics, copper release, and toxicity of nano- and micrometer-sized copper and copper(ll) oxide particles: A cross-disciplinary study. Small. 5 (3), 389-399 (2009).
check_url/es/58916?article_type=t

Play Video

Citar este artículo
Secondo, L. E., Wygal, N. J., Lewinski, N. A. A New Portable In Vitro Exposure Cassette for Aerosol Sampling. J. Vis. Exp. (144), e58916, doi:10.3791/58916 (2019).

View Video