Summary

En ny bärbar In Vitro exponering kassett för Aerosol provtagning

Published: February 22, 2019
doi:

Summary

Här presenterar vi ett protokoll för att utföra bärbara cellulära aerosol exponeringar och mäta cellulära svar. Metoden använder celler, odlas på gränssnittet luft-vätska, härma i vivo fysiologi. Cellulär respons koppar nanopartiklar aerosoler observerades som oxidativ stress genom reaktivt syre arter generering och cytotoxicitet som laktatdehydrogenas release.

Abstract

Detta protokoll införs ett nytt in vitro- exponering system, kan bärs, inklusive dess karakterisering och prestanda. Luft-vätska gränssnitt (ALI) in vitro- exponering system är ofta stora och skrymmande, försvårar transport till fältet och drift vid källan av utsläpp eller inom andningszonen. Genom miniatyrisering av dessa system, kan labbet föras till fältet, påskynda handläggningstiden och att tillhandahålla en mer lämplig exponeringsmetod som inte ändrar Aerosolen innan du kontaktar cellerna. Bärbart In vitro exponering kassett (PIVEC) anpassar en 37 mm filter kassett för in vitro- toxicitetstester utanför traditionella laboratoriemiljö. PIVEC präglades använder tre storlekar av koppar nanopartiklar för att bestämma nedfall effektivitet utifrån gravimetrisk och partikelanalys nummer koncentration. Inledande cytotoxicitet experimenten utfördes med exponerade lungceller att bestämma systemets förmåga att sätta in partiklar samtidigt som cellernas viabilitet. PIVEC ger en liknande eller ökade nedfall effektivitet när jämförande till tillgängliga vinkelrätt flöde in vitro exponering-enheter. Trots den lägre provmängder ger den lilla storleken några fördelar till den nuvarande in vitro- ALI exponering system. Dessa inkluderar möjligheten att bäras under personlig övervakning, rörlighet från laboratoriet till källan till utsläpp och möjlighet att ställa upp flera system för rumslig upplösning samtidigt en lägre användare kostar. PIVEC är ett system som kan samla in aerosoler i fältet och inom andningszonen på en air-ihop, in vitro- modell.

Introduction

Personliga provtagning med in vitro- metoder kan ge omfattande information om de biologiska effekterna av aerosoler på arbetsplatsen. 1 exponeringar mot föroreningar i luften omfatta exponeringar mot kemiskt själv, att de insamlade luftprover, nedsänkt villkor där gasen introduceras till cellsuspension, intermittent exponering med hjälp av en enhet såsom en rocker, eller direkt exponeringar vid luft-vätska gränssnitt (ALI). 2 många av dessa tekniker utförs med celler odlas i suspension eller provtagning före exponering, som alla kan påverka toxikologiska studien på grund av potentiella förändringar i aerosoler. 3 för att undvika dessa förändringar, laboratoriet kan föras till fältet med hjälp av flera in vitro- ALI kultur exponering system som används i litteratur,4,5,6,7, 8,9,10,11,12,13 dock få är kommersiellt tillgängliga. 8 , 9 , 12 dessa system är ofta skrymmande, särskilt när inklusive instrument för att reglera temperatur och luftfuktighet på den cellulära miljön och flödet klassar av provet aerosoler. Med hjälp av PIVEC, kan aerosol exponeringar utföras utanför en traditionell lab miljö eller inom andningszonen medan härma inandning villkor.

Bestämning av aerosol nedfall i vitro är viktigt att utredningen av hälsoeffekter på grund av inandning. Andningszonen, området inom 30 cm från munnen och näsan,14 är avgörande för att förstå exponering för nanopartiklar och för att länka till de biologiska effekterna i lungorna. 2 ofta, nedfall på celler definieras som ett nedfall effektivitet, partiklarna deponeras på och tas upp av cellerna dividerat med partiklarna administreras till systemet6,15 eller på en massa bas av samma belopp. 4 , 16 de nuvarande metoderna för mätning av aerosoler i andningszonen är filter baserat, fånga partiklar under en viss provtagning och använda filter för att utföra ytterligare tester. 17 personlig övervakning kräver ett litet system som kommer med nackdelen av färre prover.

Det finns många metoder att bestämma hälsoeffekter vid exponering för en aerosol. ALI modellen möjliggör aerosoler ska administreras direkt till cellerna genom luften som i en riktig exponeringsscenario, men det är mer kostnadseffektivt och mindre intensiv tid än in-vivo studier medan härma de luft-vätska hinder såsom ögon, hud och lungor. Lungceller som odlas på ALI har förmågan att generera en polariserad spärrskikt,18,19 som producerar fysiologiska egenskaper som liknar i vivo lung epitelet, inklusive slem och tensid produktion i specifika bronkial eller alveolära cellinjer, cilier slå,19 åtsittande föreningspunkter,19,20 och cell polarisering. 18 förändringar som dessa kan påverka cellulära svaret mätt i toxicitetsstudier. 21 dessutom ALI in vitro- modell resulterar är ofta mer känsliga än cellerna exponeras via fjädring modeller22 och kan modell akut i vivo inhalationstoxicitet. 23 , 24 därför en ALI exponering system som kan utföra mätningar inom andningszonen är ett naturligt nästa steg.

Genom att utsätta celler till aerosol direkt på källan till utsläpp, uppstår utredning av alla gaser, semi flyktiga ämnen och partiklar som är inblandade i blandningen effekter. När blandningen samlas på ett filter, gaser och flyktiga föreningar fångas inte och hela blandningen kan inte undersökas. Beredning av partiklar till ett pulver eller en flytande suspension kan dessutom leda till aggregering eller partikel-fluid interaktioner, till exempel upplösning, i flytande suspension. 25 , 26 när aerosolpartiklar läggs till vätskan, det finns en högre potential för tätbebyggelse,25,27 bildandet av ett protein corona,28 eller interaktion med föreningar i vätskan, vilket kan påverka nedfall och påverka biologiska svar. 29 , 30

Exponeringen vid ALI bygger på tre huvudsakliga aerosol profiler, cloud lösa, parallellt flöde och vinkelrät flöde. Moln avveckling, används av den luft-vätska gränssnitt Cell exponering (ALICE),4 är satsvis där partiklar insättning genom gravitationell och tröghetsseparation lösa som aerosoler behandlas som en enhet. Parallellt flöde, används av elektrostatiska Aerosol i vitro exponering System (TAKFOTEN)5 och Mångkulturåret exponering kammare (MEC) II,6 tillåter nedfall genom tillägg av Brownsk rörelse via flöde profilen. Vinkelrät flöde, används av en microsprayer,7 Nano Aerosol kammare för In Vitro-toxicitet (NACIVT),11 och kommersiella ALI system8,9,10,12, tillägger impaktion av partiklar inom regionen nedfall. Många av dessa exponering system är stor och skrymmande, som kräver överflödigt system för aerosol förkonditionering, pumpar för flöde, eller jämn uppvärmning kammare för inkubation av celler. Denna stora storlek minskar överförbarheten av systemet. I stället för provtagning direkt på källan till utsläpp har dessa system ofta prover inför de lab eller modell aerosoler som genereras för analys. Komplexiteten i de utsända Aerosolen kan vara förlorat i översättningen från fältet till labbet. PIVEC är mindre än nuvarande system, med en yttre yta på cirka 460 cm2 och väger endast 60 gram, med värme och luftfuktighet kontroll införlivas med de system som möjliggör en mycket portabel enhet. Minskad storlek och vikt att systemet ska bäras eller att källan till exponering, tillåter direkt provtagning.

Den stora storleken på nuvarande exponering system minskar även förmågan att utföra provtagning för att undersöka rumsliga övertoningar i koncentrationer. Denna resolution är nyckeln vid fastställandet av toxikologiska effekterna av många potentiella miljö- och yrkesrisker såsom vehicular avgaser partiklar materia eller arbetsplatsen aktiviteter där aerosolization uppstår. Omedelbart efter utsläpp, det blir en rumslig variansen i partikel koncentration. Detta växer med tiden när partiklarna skingra hela atmosfären och dessa effekter kan ändra beroende på omgivande förhållanden, såsom temperatur, tryck, vinden och solen. Partiklar kan börja åldras och oxidera samt en gång utsända31,32 och spridning priser påverkas av topografin; högre koncentrationer finns i canyons och tunnlar, där spridning effekter går långsammare och lägre koncentrationer kan hittas där det finns ett stort område för spridning. 33 dessa förändringar i dispersion priser kan ha betydande effekter på människors hälsa och kan ses när man jämför antalet astmatiska vuxna bor i urbana kontra i landsbygden inställningar. 34 medan många exponering system ger flera prover på en gång, flera system är det nödvändigt med ett överflöd av stora utrustning för att utföra rumsliga upplösningen.

Genom att labbet fältet, kan tidpunkten för analys minskas genom att använda hela cellen som en sensor. Följande kända biologiska mekanismer och slutpunkter kan stöd i fastställandet av aerosol sammansättning och storlek. På grund av långsamma clearance metoder, inklusive mukociliär clearance, fagocytos och flyttning, interagerar dessa partiklar ofta med celler för cirka dagar till veckor3 generera oxidativ stress, inflammation och även celldöd. Dessa biologiska endpoints kan vara utgångspunkterna för ogynnsamt utfall vägar för hjärt-kärlsjukdom eller kronisk obstruktiv lungsjukdom. Dessutom utförde Wiemenn et al. en array av in vitro- analyser att jämföra med litteratur värden för kort sikt i vivo inhalationstoxicitet. 35 In vivo svar förutspåddes med två av fyra positiva resultat från testning cytotoxicitet via laktatdehydrogenas release, oxidativ stress från glutation minskning och väteperoxid bildas och release, och inflammation potentiella från tumörnekrosfaktor alfa genen. Av tio nanosized metalloxider testade, testade sex som aktiv (titanoxid, zinkoxid och fyra olika cerium oxide) med exponering in vitro med bekräftelse i vivo

För att studera effekterna av aerosoler i en yrkesmässig miljö, utvecklat vårt labb i PIVEC för exponeringar i fältet. Dessutom PIVEC kan bäras för personliga provtagning att övervaka och undersöka som den 37 mm filter kassetten36 exponering genom inandning eller flera system kan användas för att uppnå rumslig upplösning inom ett visst område. I detta protokoll diskuteras karakterisering och användningen av PIVEC. Efter exponering observeras de biologiska effekterna genom cytotoxicitet analyser.

Protocol

Operatörerna måste bära skyddsutrustning (labbrock, handskar, goggles) när utför steg 1, 2, 3, 5 och 6. 1. beredning av material Förbereda material för Systemmontage och exponering för att säkerställa repeterbarheten. Se till att använda nya eller 70% etanol rengöras ¼ ”innerdiameter Konduktiv slang och ¼” ytterdiameter kontakter för församlingens system. Store testmaterial inklusive filter, PIVEC komponenter, pincett och par…

Representative Results

Yrkesmässig in vitro- toxikologi handlar om att upprätthålla cellulär lönsamhet medan du utför aerosol exponering. PIVEC systemet visas i figur 2, inklusive temperatur och luftfuktighet kontroll och den slitna PIVEC. Temperaturen var upprätthålls med hjälp av en batteridriven resistiv värmare och aerosoler fuktad med ökade naturliga befuktning genom ett poröst, fuktade rör. I en kontrollerad aerosol inställning inuti ett laboratorium, k…

Discussion

Filterkassetter ger en enkel och billig metod för att samla in aerosoler i andningszonen; dock aerosol prover ur filter inte representerar hela aerosoler (dvs gaser, flyktiga ämnen och partiklar) och därmed begränsa bedömningen av relaterade biologiska effekter. Använder den ursprungliga utformningen av 37 mm filter kassetten, är PIVEC utformad för att underhålla bärbarhet och härma i vivo avsättning av partiklar från inandning. PIVEC är betydligt mindre än nuvarande ALI exponering system, ungefä…

Divulgaciones

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Författarna vill tacka Boris Solomonov och Virginia Commonwealth Innovation maskinverkstaden för hjälp med prototyper enheten. Författarna vill även tacka Cristian Romero-Fuentes i gruppen Lewinski, Dr Vitaliy Avrutin, Dr. Dmitry Pestov och Virginia Commonwealth nanomaterial Core karakterisering anläggningen för deras hjälp med partikel karakterisering. Detta arbete stöds av start medel till Dr Lewinski från College of Engineering vid Virginia Commonwealth University.

Materials

Scanning mobility particle sizer (SMPS) TSI, Inc. 3910 NanoSMPS
Optical particle sizer (OPS) TSI, Inc. 3330
Stainless Steel Pipe, 4" Long McMaster-Carr 4830K116 Standard-Wall 304/304L, Threaded on Both Ends, 1/8 Pipe Size
Brass Ball Valve with Lever Handle McMaster-Carr 4112T12 Compact High-Pressure Rating, 1/8 NPT Female
Steel Pipe, 2" Long McMaster-Carr 7753K121 Standard Wall, Threaded on One End, 1/8 Pipe Size
HEPA filter GE Healthcare 09-744-12 HEPA-Cap Disposable Air Filtration Capsule
Vacuum Generator PISCO USA VCH10-018C
PIVEC VCU For design please contact authors
Resistive heater
1/4" barbed connectors Zefon International, Inc. 459743
Porous tubing Scientific Commodities, Inc. BB2062-1814A Hydrophilic 10 um pores
Battery power bank
Cell culture insert Fisherbrand 353095 24 well plate insert
Filter Forceps Fisherbrand 09-753-50
Transfer Pipette ThermoScientific 13-711-27
Glass Fiber Filters SKC 225-7 Binder-Free Type AE Filter 37 MM 1.00 um pore
Ultra Micro Balance A&D BM-22 Housed in environmental chamber
37 mm filter cassette SKC 225-3250 Filter Cassette Blank, 37 mm, Clear Styrene
Variable flow vacuum pump SKC 220-5000TC AirChek TOUCH, 5 to 5000 mL/min
Copper Particles U.S. Research Materials, Inc. US1090 40 nm
Copper Particles U.S. Research Materials, Inc. US1088 100 nm
Copper Particles U.S. Research Materials, Inc. US1117M 800 nm

Referencias

  1. Lewinski, N. A., Secondo, L. E., Ferri, J. K. Enabling Real-Time Hazard Assessment at the Workplace Enabling Real-Time Hazard Assessment at the Workplace. 14th Global Congress on Process Safety. , 1-9 (2018).
  2. Bakand, S., Winder, C., Khalil, C., Hayes, A. Toxicity assessment of industrial chemicals and airborne contaminants: transition from in vivo to in vitro test methods: a review. Inhalation Toxicology. 17, 775-787 (2005).
  3. Bakand, S., Hayes, A. Troubleshooting methods for toxicity testing of airborne chemicals in vitro. Journal of Pharmacological and Toxicological Methods. 61 (2), 76-85 (2010).
  4. Lenz, A. G., et al. A dose-controlled system for air-liquid interface cell exposure and application to zinc oxide nanoparticles. Particle and Fibre Toxicology. 6, 32 (2009).
  5. de Bruijne, K., et al. Design and testing of Electrostatic Aerosol in Vitro Exposure System (EAVES): an alternative exposure system for particles. Inhalation Toxicology. 21, 91-101 (2009).
  6. Asimakopoulou, A., Daskalos, E., Lewinski, N., Riediker, M., Papaioannou, E., Konstandopoulos, A. G. Development of a dose-controlled multiculture cell exposure chamber for efficient delivery of airborne and engineered nanoparticles. Journal of Physics: Conference. 429, 1-10 (2013).
  7. Grigg, J., et al. DNA damage of macrophages at an air-tissue interface induced by metal nanoparticles Macrophage. Nanotoxicology. 3 (4), 348-354 (2009).
  8. Aufderheide, M., Knebel, J. W., Ritter, D. An improved in vitro model for testing the pulmonary toxicity of complex mixtures such as cigarette smoke. Experimental and Toxicologic Pathology. 55, 51-57 (2003).
  9. Aufderheide, M., Halter, B., Möhle, N., Hochrainer, D. The CULTEX RFS: A comprehensive technical approach for the in vitro exposure of airway epithelial cells to the particulate matter at the air-liquid interface. BioMed Research International. 2013 (1), 1-15 (2013).
  10. Tippe, A., Heinzmann, U., Roth, C. Deposition of fine and ultrafine aerosol particles during exposure at the air/cell interface. Journal of Aerosol Science. 33, 207-218 (2002).
  11. Savi, M., et al. A novel exposure system for the efficient and controlled deposition of aerosol particles onto cell cultures. Environmental Science and Technology. 42, 5667-5674 (2008).
  12. Fröhlich, E., et al. Comparison of two in vitro systems to assess cellular effects of nanoparticles-containing aerosols. Toxicology in Vitro. 27, 409-417 (2013).
  13. Frijns, E., et al. A Novel Exposure System Termed NAVETTA for in Vitro Laminar Flow Electrodeposition of Nanoaerosol and Evaluation of Immune Effects in Human Lung Reporter Cells. Environmental Science and Technology. 51 (9), 5259-5269 (2017).
  14. Vincent, J. H. . Aerosol Science for Industrial Hygienists. , (1995).
  15. Fujitani, Y., Sugaya, Y., Hashiguchi, M., Furuyama, A., Hirano, S., Takami, A. Particle deposition efficiency at air-liquid interface of a cell exposure chamber. Journal of Aerosol Science. 81, 90-99 (2015).
  16. Elihn, K., Cronholm, P., Karlsson, H. L., Midander, K., Odnevall Wallinder, I., Möller, L. Cellular Dose of Partly Soluble Cu Particle Aerosols at the Air-Liquid Interface Using an. In Vitro Lung Cell Exposure System. Journal of Aerosol Medicine and Pulmonary Drug Delivery. 26 (2), 84-93 (2013).
  17. . . Aerosols Handbook Measurement, Dosimetry, and Health Effects. , (2005).
  18. de Souza Carvalho, C., Daum, N., Lehr, C. M. Carrier interactions with the biological barriers of the lung: Advanced in vitro models and challenges for pulmonary drug delivery. Advanced Drug Delivery Reviews. 75, 129-140 (2014).
  19. Fattal, E., Grabowski, N., Mura, S., Vergnaud, J., Tsapis, N., Hillaireau, H. Lung Toxicity of Biodegradable Nanoparticles. Journal of Biomedical Nanotechnology. 10 (10), 2852-2864 (2014).
  20. Klein, S. G., Serchi, T., Hoffmann, L., Blömeke, B., Gutleb, A. C. An improved 3D tetraculture system mimicking the cellular organisation at the alveolar barrier to study the potential toxic effects of particles on the lung. Particle and Fibre Toxicology. 10, 31 (2013).
  21. Oberdörster, G., et al. Principles for characterizing the potential human health effects from exposure to nanomaterials: elements of a screening strategy. Particle and Fibre Toxicology. 2, 8 (2005).
  22. Secondo, L. E., Liu, N. J., Lewinski, N. A. Methodological considerations when conducting in vitro, air-liquid interface exposures to engineered nanoparticle aerosols. Critical Reviews in Toxicology. , 1-32 (2016).
  23. Sayes, C. M., Reed, K. L., Warheit, D. B. Assessing toxicology of fine and nanoparticles: Comparing in vitro measurements to in vivo pulmonary toxicity profiles. Toxicological Sciences. 97 (1), 163-180 (2007).
  24. Maier, K. L., et al. Health effects of ambient particulate matter–biological mechanisms and inflammatory responses to in vitro and in vivo particle exposures. Inhalation Toxicology. 20 (May 2007), 319-337 (2008).
  25. Cohen, J. M., Teeguarden, J. G., Demokritou, P. An integrated approach for the in vitro dosimetry of engineered nanomaterials. Particle and Fibre Toxicology. 11 (1), 20 (2014).
  26. Deloid, G., et al. Estimating the effective density of engineered nanomaterials for in vitro dosimetry. Nature Communications. 5, 3514 (2014).
  27. Pal, A. K., Bello, D., Cohen, J., Demokritou, P. Implications of in vitro dosimetry on toxicological ranking of low aspect ratio engineered nanomaterials. Nanotoxicology. , 1-15 (2015).
  28. Walkey, C., et al. Protein corona fingerprinting predicts the cellular interaction of gold and silver nanoparticles. ACS Nano. 8 (3), 2439-2455 (2014).
  29. Raemy, D. O., et al. Effects of flame made zinc oxide particles in human lung cells – a comparison of aerosol and suspension exposures. Particle and Fibre Toxicology. 9 (1), 33 (2012).
  30. Holder, A. L., Lucas, D., Goth-goldstein, R., Koshland, C. P. Cellular response to diesel exhaust particles strongly depends on the exposure method. Toxicological Sciences. 103 (1), 108-115 (2008).
  31. Sanderson, P., et al. Characterisation of iron-rich atmospheric submicrometre particles in the roadside environment. Atmospheric Environment. 140. , 167-175 (2016).
  32. Burtscher, H. Physical characterization of particulate emissions from diesel engines: A review. Journal of Aerosol Science. 36 (7), 896-932 (2005).
  33. Ris, C. U.S. EPA health assessment for diesel engine exhaust: a review. Inhalation Toxicology. 19 (Suppl. 1), 229-239 (2007).
  34. Jie, Y., Isa, Z. M., Jie, X., Ju, Z. L., Ismail, N. H. Urban vs. Rural Factors That Affect Adult Asthma. Reviews of Environmental Contamination and Toxicology. 226, (2013).
  35. Wiemann, M., Vennemann, A., Sauer, U. G., Wiench, K., Ma-Hock, L., Landsiedel, R. An in vitro alveolar macrophage assay for predicting the short-term inhalation toxicity of nanomaterials. Journal of Nanobiotechnology. 14 (1), 16 (2016).
  36. Kenny, L. C., et al. A collaborative european study of personal inhalable aerosol sampler performance. Annals of Occupational Hygiene. 41 (2), 135-153 (1997).
  37. Tiwari, A. J., Fields, C. G., Marr, L. C. A Cost-Effective Method of Aerosolizing Dry Powdered Nanoparticles. Aerosol Science and Technology. 47 (11), 1267-1275 (2013).
  38. Blank, F., Rothen-Rutishauser, B. M., Schurch, S., Gehr, P. An Optimized In Vitro Model of the Respiratory Tract Wall to Study Particle Cell Interactions. Journal of Aerosol Medicine. 19 (3), 392-405 (2006).
  39. Laboratory, N. C. . NCL Method GTA-2 HEP G2 Hepatocarcinoma Cytotoxicity Assay. (November), 1-9 (2015).
  40. Kim, J. S., Peters, T. M., O’Shaughnessy, P. T., Adamcakova-Dodd, A., Thorne, P. S. Validation of an in vitro exposure system for toxicity assessment of air-delivered nanomaterials. Toxicology in Vitro. 27 (1), 164-173 (2013).
  41. Mertes, P., et al. A compact and portable deposition chamber to study nanoparticles in air-exposed tissue. Journal of aerosol medicine and pulmonary drug delivery. 26, 228-235 (2013).
  42. Panas, A., et al. Silica nanoparticles are less toxic to human lung cells when deposited at the air-liquid interface compared to conventional submerged exposure. Beilstein Journal of Nanotechnology. 5, 1590-1602 (2014).
  43. Zavala, J., et al. Regulating temperature and relative humidity in air-liquid interface in vitro systems eliminates cytotoxicity resulting from control air exposures. Toxicology Research. 6, 448-459 (2017).
  44. Jing, X., Park, J. H., Peters, T. M., Thorne, P. S. Toxicity of copper oxide nanoparticles in lung epithelial cells exposed at the air – liquid interface compared with in vivo assessment. TOXICOLOGY IN VITRO. 29 (3), 502-511 (2015).
  45. Bitterle, E., et al. Dose-controlled exposure of A549 epithelial cells at the air-liquid interface to airborne ultrafine carbonaceous particles. Chemosphere. 65, 1784-1790 (2006).
  46. Steinritz, D., et al. Use of the Cultex Radial Flow System as an in vitro exposure method to assess acute pulmonary toxicity of fine dusts and nanoparticles with special focus on the intra- and inter-laboratory reproducibility. Chemico-Biological Interactions. 206 (3), 479-490 (2013).
  47. Cronholm, P., et al. Intracellular uptake and toxicity of Ag and CuO nanoparticles: A comparison between nanoparticles and their corresponding metal ions. Small. 9 (7), 970-982 (2013).
  48. Cronholm, P., Midander, K., Karlsson, H. L., Elihn, K., Wallinder, I. O., Möller, L. Effect of sonication and serum proteins on copper release from copper nanoparticles and the toxicity towards lung epithelial cells. Nanotoxicology. 5 (2), 269-281 (2011).
  49. Midander, K., et al. Surface characteristics, copper release, and toxicity of nano- and micrometer-sized copper and copper(ll) oxide particles: A cross-disciplinary study. Small. 5 (3), 389-399 (2009).
check_url/es/58916?article_type=t

Play Video

Citar este artículo
Secondo, L. E., Wygal, N. J., Lewinski, N. A. A New Portable In Vitro Exposure Cassette for Aerosol Sampling. J. Vis. Exp. (144), e58916, doi:10.3791/58916 (2019).

View Video