Summary

En nye Portable In Vitro eksponering kassett for Aerosol prøvetaking

Published: February 22, 2019
doi:

Summary

Her presenterer vi en protokoll for å utføre bærbare mobilnettet aerosol eksponeringer og måle cellulær respons. Metoden bruker celler, dyrket i luft-flytende grensesnittet, etterligne i vivo fysiologi. Cellulær respons til kobber hydrogenion aerosoler ble observert som oksidativt stress gjennom reaktive oksygen arter generasjon og cytotoksisitet som laktat dehydrogenase utgivelse.

Abstract

Denne protokollen introduserer et nytt i vitro eksponering system kan bæres, inkludert sin karakteristikk og ytelse. Air-flytende grensesnitt (ALI) in vitro eksponering-systemer er ofte store og klumpete, gjør transport til feltet og drift på kilden av utslipp eller sonen puste vanskelig. Gjennom miniatyrisering av disse systemene, kan laboratoriet bli brakt til feltet påskynde behandlingstid og gir en mer passende eksponering metode som ikke endrer aerosoler før du kontakter cellene. Bærbare In vitro eksponering kassett (PIVEC) tilpasser en 37 mm filter kassett å tillate i vitro toksisitet testing utenfor tradisjonelle laboratorium innstillingen. PIVEC var preget bruker tre størrelsene av kobber nanopartikler å avgjøre deponering effektivitet basert på gravimetric og partikkel nummer konsentrasjon analyse. Første cytotoksisitet eksperimenter ble utført med synlige lungekreft cellene for å fastslå muligheten for systemet å sette partikler samtidig opprettholde celle levedyktighet. PIVEC gir en lignende eller økt deponering effektivitet når sammenligne tilgjengelig vinkelrett flyt i vitro eksponering enheter. Til tross for lavere eksempel gjennomstrømningen gir den lille størrelsen noen fordeler gjeldende i vitro ALI eksponering systemer. Disse inkluderer muligheten til å brukes for personlig overvåking, mobilitet fra laboratoriet til kilden til utslipp, og muligheten til å sette opp flere systemer for romlig oppløsning samtidig opprettholde en lavere bruker koste. PIVEC er et system kan samle aerosoler i feltet med sonen puste på en luft-tilkobles, i vitro modellen.

Introduction

Personlig prøvetaking med i vitro teknikker kan gi omfattende informasjon om biologiske effekter av aerosoler på arbeidsplassen. 1 for forurensninger i luften inkluderer eksponeringer til kjemiske, til luft utvalgene, under neddykket forhold hvor gassen er introdusert til celle suspensjon, intermitterende eksponeringer med en enhet som en rocker, eller direkte eksponeringer i luft-flytende grensesnittet (ALI). 2 mange av disse teknikkene utføres med celler dyrket i suspensjon eller innsamling av prøver før eksponering, hvorav hver kan påvirke toksikologiske studien på grunn av mulige endringer i aerosoler. 3 for å unngå disse endringene, laboratoriet kan bli brakt til feltet bruker flere i vitro ALI kultur eksponering systemer som brukes i litteratur,4,5,6,7, 8,,9,,10,,11,,12,,13 men få er kommersielt tilgjengelig. 8 , 9 , 12 disse systemene er ofte store, spesielt når inkludert instrumenter å regulere temperatur og fuktighet av mobilnettet miljø og flyt av prøven aerosoler. Ved hjelp av PIVEC, kan aerosol eksponeringer utføres utenfor en tradisjonell lab innstilling eller i sonen puste mens mimicking innånding forhold.

Fastsettelse av aerosol avsettelse i vitro er viktig å undersøke helseeffekter på grunn av innånding. Sonen puste området innenfor 30 cm fra munn og nese,14 er avgjørende for å forstå eksponering nanopartikler og for å koble til biologiske effekter i lungene. 2 ofte avsetning på celler er definert som en avsetning effektivitet, partikler avsatt på og tatt opp av cellene delt partikler administrert til systemet6,15 eller på masse basis av samme beløpene. 4 , 16 gjeldende metoder for måling aerosoler i sonen puste er filter basert, fange partikler over en gitt samplingsperiode og bruke filtre til å gjennomføre ytterligere testing. 17 personlig overvåking krever et lite system som følger med bakdelen av færre prøver.

Det er mange metoder å avgjøre helseeffekter fra eksponering for aerosol. ALI modellen gir aerosoler gis direkte til cellene til luften som en ekte eksponering scenario, men det er mer kostnadseffektiv og mindre tid intensive enn i vivo studier samtidig mimicking luft-flytende barrierer som øynene, huden og lungene. Lungekreft cellene vokst på ALI har muligheten til å generere en polarisert barriere lag,18,19 som produserer fysiologiske trekk som ligner i vivo lunge epitel, inkludert mucus og surfactant produksjon i spesifikke bronkial eller alveolar cellelinjer, flimmerhårene slo,19 stramt veikryss,19,20 og celle polarisering. 18 endre som dette kan påvirke den cellulær responsen målt i toksisitet studier. 21 i tillegg ALI i vitro modell resultater er ofte mer følsom enn celler utsatt via hjuloppheng modeller22 og er i stand til modell akutt i vivo innånding toksisitet. 23 , 24 derfor, en ALI eksponering system som kan utføre målinger i sonen puste er en naturlig neste steg.

Ved å utsette cellene aerosol direkte på kilden til utslipp, oppstår undersøkelse av effekten av alle gasser, semi flyktige forbindelser og partikler i blandingen. Når blandingen samles på et filter, gasser og flyktige forbindelser er ikke tatt, og hele blandingen kan ikke undersøkes. I tillegg kan rekonstituering partikler i et pulver eller en flytende suspensjon føre til samling eller partikkel-fluid interaksjoner, for eksempel oppløsningen, i flytende suspensjon. 25 , 26 når aerosol partikler legges til væske, det er en høyere potensial for agglomeration,25,27 dannelsen av protein corona,28 eller interaksjon med forbindelser i væsken, noe som kan påvirke avsettelse og påvirke de biologiske responsen. 29 , 30

Eksponering på ALI er basert på tre viktigste aerosol profiler, Sky bosetting, parallelle flyt og vinkelrett flyt. Sky bosetting, brukes av luft-flytende grensesnitt celle eksponering (ALICE),4 er en batch-systemet der partikler innskudd gjennom gravitasjons og diffusional bosetting som aerosoler behandles som én enhet. Parallell flyt, brukes av elektrostatisk Aerosol i vitro eksponering systemet (TAKSKJEGGET)5 og flerkulturalitet eksponering kammer (MEC) II,6 kan til deponi gjennom tillegg av Brownsk bevegelse gjennom flyt profilen. Vinkelrett flyt, brukes av en microsprayer,7 Nano forstøverkammeret for In Vitro toksisitet (NACIVT),11 og kommersielle ALI systemer8,9,10,12, legger impaction av partikler i regionen deponering. Mange av disse eksponering systemer er stor og klumpete, krever overflødig systemer for aerosol pre condition, pumper for strømmen, eller selv oppvarming kamre for inkubering av celler. Denne størrelsen reduseres portabilitet av systemet. I stedet for prøvetaking direkte på kilden til utslipp har disse systemene ofte prøver brakt til lab eller modell aerosoler generert for analyse. Kompleksiteten av slippes ut aerosoler kan gå tapt i oversettelse fra feltet til laboratoriet. PIVEC er mindre enn gjeldende systemer, med en ekstern areal på ca 460 cm2 og veie bare 60 gram, termisk og fuktighet kontroll innlemmet i systemet muliggjør en svært bærbar enhet. Redusert størrelse og vekt tillater systemet å bli slitt eller tatt til kilden for eksponering, tillater direkte prøvetaking.

Den store størrelsen på gjeldende eksponering systemer reduserer også muligheten til å utføre prøvetaking for å undersøke romlige graderinger i konsentrasjoner. Denne løsningen er nøkkelen når toksikologiske effekten av mange potensielle miljømessige og yrkesmessig farer som vehicular eksos partikler saken eller arbeidsplass aktiviteter hvor aerosolization forekommer. Umiddelbart etter utslipp, blir det en romlig varians i partikkel konsentrasjon. Dette vokser med tid som partikler spre seg i hele atmosfæren og disse effektene kan endre basert på forholdene, som temperatur, trykk, vind og sol. Partikler kan begynne å alder og oksidere også når slippes ut31,32 og spredningen priser påvirkes av topografi; høyere konsentrasjoner vil bli funnet i daler og tunneler, der spredning effekten er redusert, og lave konsentrasjoner finnes der det er et stort område for spredning. 33 disse endringene i spredningen priser kan ha betydelig effekt på menneskers helse og kan ses når sammenlignende mange astmatisk voksne bor i urbane versus i landlige omgivelser. 34 mange eksponering systemer gir flere eksempler på en gang, flere systemer er nødvendig med en overflod av store utstyr å utføre romlig oppløsning.

Ved å bringe laboratoriet til feltet, kan tidspunktet for analysen reduseres ved å bruke hele cellen som en sensor. Følgende kjente biologiske mekanismer og endepunkt kan hjelpe i fastsettelse av aerosol sammensetning og størrelse. På grunn av treg klaring metoder, inkludert mucociliary klaring og fagocytose translokasjon, er disse partiklene ofte samspill med celler i ca dager til uker3 generere oksidativt stress, betennelser og selv celledød. Disse biologiske endepunkt kan være utgangspunkt for negative resultatet trasé for hjerte-og karsykdommer eller kroniske hindrende lunge sykdom. I tillegg utført Wiemenn et al. en rekke i vitro analyser sammenligne med litteratur verdier for kort sikt i vivo innånding toksisitet. 35 I vivo svar ble spådd med to av fire positive resultater fra testing cytotoksisitet via laktat dehydrogenase utgivelse, oksidativt stress fra glutation reduksjon og hydrogenperoksid dannelse og utgivelsen og betennelser potensielle fra tumor nekrose faktor alpha genet. Ut av ti nanosized-metalloksider testet, seks testet som aktiv (Titan oksid, sink oksid og fire ulike cerium-oksid) bruke eksponeringer i vitro med bekreftelse i vivo

For å studere virkningene av aerosoler i yrkesmessig omgivelser, utviklet vår lab PIVEC for eksponeringer i-feltet. I tillegg til PIVEC kan brukes for personlig prøvetaking overvåke og undersøke innånding som de 37 mm filter kassett36 eller flere systemer kan brukes til å oppnå romlig oppløsning innen et gitt område. I denne protokollen drøftes karakterisering og bruk av PIVEC. Etter eksponering, er biologiske effekter observert gjennom cytotoksisitet analyser.

Protocol

Operatorer må ha personlig verneutstyr (f.eks Laboratoriefrakk, hansker, beskyttelsesbriller) når utføre trinn 1, 2, 3, 5 og 6. 1. forberedelse av materialer Utarbeide materiale for systemet montering og eksponering for å sikre repeterbarhet. Sørg for å bruke nye eller 70% etanol renset ¼” indre diameter ledende rør og ¼” ytre diameter kontakter for samlingen systemet. Store testen materiale inkludert filtre, PIVEC komponenter, pinsett …

Representative Results

Yrkesmessig i vitro toksikologi innebærer opprettholde mobilnettet levedyktighet mens du utfører aerosol eksponering. PIVEC systemet er vist i figur 2, inkludert temperatur og fuktighetskontroll og slitte PIVEC. Temperaturen var vedlikeholdt ved hjelp av en batteridrevet resistiv ovn og aerosoler fuktet med økt naturlig luftfukting gjennom en porøs, fuktet rør. I en kontrollert aerosol sette i et laboratorium, kan PIVEC settes opp for eksponerin…

Discussion

Filteret kassetter gir en enkel og rimelig metode for å samle aerosoler i sonen puste; imidlertid aerosol eksempler Hentet fra filtre ikke representerer hele aerosoler (i.e. gasser, flyktige og svevestøv) og dermed begrense vurdering av relaterte biologiske effekter. Bruker den opprinnelige utformingen av 37 mm filteret kassetten, er PIVEC utformet for å opprettholde flyttbarhet og etterligne i vivo avsetning av partikler fra innånding. PIVEC er betydelig mindre enn gjeldende ALI eksponering systemer, omtren…

Divulgaciones

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Forfatterne vil gjerne takke Boris Solomonov og Virginia Commonwealth innovasjon maskin butikken for hjelp med rapid prototyping enheten. Forfatterne vil også gjerne takke Cristian Romero-Fuentes av Lewinski Group, Dr. Vitaliy Avrutin, Dr. Dmitry Pestov og Virginia Commonwealth nanomaterialer Core karakterisering anlegg for deres hjelp med partikkel karakterisering. Dette arbeidet ble støttet av oppstart midler formidles til Dr. Lewinski av College of Engineering ved Virginia Commonwealth University.

Materials

Scanning mobility particle sizer (SMPS) TSI, Inc. 3910 NanoSMPS
Optical particle sizer (OPS) TSI, Inc. 3330
Stainless Steel Pipe, 4" Long McMaster-Carr 4830K116 Standard-Wall 304/304L, Threaded on Both Ends, 1/8 Pipe Size
Brass Ball Valve with Lever Handle McMaster-Carr 4112T12 Compact High-Pressure Rating, 1/8 NPT Female
Steel Pipe, 2" Long McMaster-Carr 7753K121 Standard Wall, Threaded on One End, 1/8 Pipe Size
HEPA filter GE Healthcare 09-744-12 HEPA-Cap Disposable Air Filtration Capsule
Vacuum Generator PISCO USA VCH10-018C
PIVEC VCU For design please contact authors
Resistive heater
1/4" barbed connectors Zefon International, Inc. 459743
Porous tubing Scientific Commodities, Inc. BB2062-1814A Hydrophilic 10 um pores
Battery power bank
Cell culture insert Fisherbrand 353095 24 well plate insert
Filter Forceps Fisherbrand 09-753-50
Transfer Pipette ThermoScientific 13-711-27
Glass Fiber Filters SKC 225-7 Binder-Free Type AE Filter 37 MM 1.00 um pore
Ultra Micro Balance A&D BM-22 Housed in environmental chamber
37 mm filter cassette SKC 225-3250 Filter Cassette Blank, 37 mm, Clear Styrene
Variable flow vacuum pump SKC 220-5000TC AirChek TOUCH, 5 to 5000 mL/min
Copper Particles U.S. Research Materials, Inc. US1090 40 nm
Copper Particles U.S. Research Materials, Inc. US1088 100 nm
Copper Particles U.S. Research Materials, Inc. US1117M 800 nm

Referencias

  1. Lewinski, N. A., Secondo, L. E., Ferri, J. K. Enabling Real-Time Hazard Assessment at the Workplace Enabling Real-Time Hazard Assessment at the Workplace. 14th Global Congress on Process Safety. , 1-9 (2018).
  2. Bakand, S., Winder, C., Khalil, C., Hayes, A. Toxicity assessment of industrial chemicals and airborne contaminants: transition from in vivo to in vitro test methods: a review. Inhalation Toxicology. 17, 775-787 (2005).
  3. Bakand, S., Hayes, A. Troubleshooting methods for toxicity testing of airborne chemicals in vitro. Journal of Pharmacological and Toxicological Methods. 61 (2), 76-85 (2010).
  4. Lenz, A. G., et al. A dose-controlled system for air-liquid interface cell exposure and application to zinc oxide nanoparticles. Particle and Fibre Toxicology. 6, 32 (2009).
  5. de Bruijne, K., et al. Design and testing of Electrostatic Aerosol in Vitro Exposure System (EAVES): an alternative exposure system for particles. Inhalation Toxicology. 21, 91-101 (2009).
  6. Asimakopoulou, A., Daskalos, E., Lewinski, N., Riediker, M., Papaioannou, E., Konstandopoulos, A. G. Development of a dose-controlled multiculture cell exposure chamber for efficient delivery of airborne and engineered nanoparticles. Journal of Physics: Conference. 429, 1-10 (2013).
  7. Grigg, J., et al. DNA damage of macrophages at an air-tissue interface induced by metal nanoparticles Macrophage. Nanotoxicology. 3 (4), 348-354 (2009).
  8. Aufderheide, M., Knebel, J. W., Ritter, D. An improved in vitro model for testing the pulmonary toxicity of complex mixtures such as cigarette smoke. Experimental and Toxicologic Pathology. 55, 51-57 (2003).
  9. Aufderheide, M., Halter, B., Möhle, N., Hochrainer, D. The CULTEX RFS: A comprehensive technical approach for the in vitro exposure of airway epithelial cells to the particulate matter at the air-liquid interface. BioMed Research International. 2013 (1), 1-15 (2013).
  10. Tippe, A., Heinzmann, U., Roth, C. Deposition of fine and ultrafine aerosol particles during exposure at the air/cell interface. Journal of Aerosol Science. 33, 207-218 (2002).
  11. Savi, M., et al. A novel exposure system for the efficient and controlled deposition of aerosol particles onto cell cultures. Environmental Science and Technology. 42, 5667-5674 (2008).
  12. Fröhlich, E., et al. Comparison of two in vitro systems to assess cellular effects of nanoparticles-containing aerosols. Toxicology in Vitro. 27, 409-417 (2013).
  13. Frijns, E., et al. A Novel Exposure System Termed NAVETTA for in Vitro Laminar Flow Electrodeposition of Nanoaerosol and Evaluation of Immune Effects in Human Lung Reporter Cells. Environmental Science and Technology. 51 (9), 5259-5269 (2017).
  14. Vincent, J. H. . Aerosol Science for Industrial Hygienists. , (1995).
  15. Fujitani, Y., Sugaya, Y., Hashiguchi, M., Furuyama, A., Hirano, S., Takami, A. Particle deposition efficiency at air-liquid interface of a cell exposure chamber. Journal of Aerosol Science. 81, 90-99 (2015).
  16. Elihn, K., Cronholm, P., Karlsson, H. L., Midander, K., Odnevall Wallinder, I., Möller, L. Cellular Dose of Partly Soluble Cu Particle Aerosols at the Air-Liquid Interface Using an. In Vitro Lung Cell Exposure System. Journal of Aerosol Medicine and Pulmonary Drug Delivery. 26 (2), 84-93 (2013).
  17. . . Aerosols Handbook Measurement, Dosimetry, and Health Effects. , (2005).
  18. de Souza Carvalho, C., Daum, N., Lehr, C. M. Carrier interactions with the biological barriers of the lung: Advanced in vitro models and challenges for pulmonary drug delivery. Advanced Drug Delivery Reviews. 75, 129-140 (2014).
  19. Fattal, E., Grabowski, N., Mura, S., Vergnaud, J., Tsapis, N., Hillaireau, H. Lung Toxicity of Biodegradable Nanoparticles. Journal of Biomedical Nanotechnology. 10 (10), 2852-2864 (2014).
  20. Klein, S. G., Serchi, T., Hoffmann, L., Blömeke, B., Gutleb, A. C. An improved 3D tetraculture system mimicking the cellular organisation at the alveolar barrier to study the potential toxic effects of particles on the lung. Particle and Fibre Toxicology. 10, 31 (2013).
  21. Oberdörster, G., et al. Principles for characterizing the potential human health effects from exposure to nanomaterials: elements of a screening strategy. Particle and Fibre Toxicology. 2, 8 (2005).
  22. Secondo, L. E., Liu, N. J., Lewinski, N. A. Methodological considerations when conducting in vitro, air-liquid interface exposures to engineered nanoparticle aerosols. Critical Reviews in Toxicology. , 1-32 (2016).
  23. Sayes, C. M., Reed, K. L., Warheit, D. B. Assessing toxicology of fine and nanoparticles: Comparing in vitro measurements to in vivo pulmonary toxicity profiles. Toxicological Sciences. 97 (1), 163-180 (2007).
  24. Maier, K. L., et al. Health effects of ambient particulate matter–biological mechanisms and inflammatory responses to in vitro and in vivo particle exposures. Inhalation Toxicology. 20 (May 2007), 319-337 (2008).
  25. Cohen, J. M., Teeguarden, J. G., Demokritou, P. An integrated approach for the in vitro dosimetry of engineered nanomaterials. Particle and Fibre Toxicology. 11 (1), 20 (2014).
  26. Deloid, G., et al. Estimating the effective density of engineered nanomaterials for in vitro dosimetry. Nature Communications. 5, 3514 (2014).
  27. Pal, A. K., Bello, D., Cohen, J., Demokritou, P. Implications of in vitro dosimetry on toxicological ranking of low aspect ratio engineered nanomaterials. Nanotoxicology. , 1-15 (2015).
  28. Walkey, C., et al. Protein corona fingerprinting predicts the cellular interaction of gold and silver nanoparticles. ACS Nano. 8 (3), 2439-2455 (2014).
  29. Raemy, D. O., et al. Effects of flame made zinc oxide particles in human lung cells – a comparison of aerosol and suspension exposures. Particle and Fibre Toxicology. 9 (1), 33 (2012).
  30. Holder, A. L., Lucas, D., Goth-goldstein, R., Koshland, C. P. Cellular response to diesel exhaust particles strongly depends on the exposure method. Toxicological Sciences. 103 (1), 108-115 (2008).
  31. Sanderson, P., et al. Characterisation of iron-rich atmospheric submicrometre particles in the roadside environment. Atmospheric Environment. 140. , 167-175 (2016).
  32. Burtscher, H. Physical characterization of particulate emissions from diesel engines: A review. Journal of Aerosol Science. 36 (7), 896-932 (2005).
  33. Ris, C. U.S. EPA health assessment for diesel engine exhaust: a review. Inhalation Toxicology. 19 (Suppl. 1), 229-239 (2007).
  34. Jie, Y., Isa, Z. M., Jie, X., Ju, Z. L., Ismail, N. H. Urban vs. Rural Factors That Affect Adult Asthma. Reviews of Environmental Contamination and Toxicology. 226, (2013).
  35. Wiemann, M., Vennemann, A., Sauer, U. G., Wiench, K., Ma-Hock, L., Landsiedel, R. An in vitro alveolar macrophage assay for predicting the short-term inhalation toxicity of nanomaterials. Journal of Nanobiotechnology. 14 (1), 16 (2016).
  36. Kenny, L. C., et al. A collaborative european study of personal inhalable aerosol sampler performance. Annals of Occupational Hygiene. 41 (2), 135-153 (1997).
  37. Tiwari, A. J., Fields, C. G., Marr, L. C. A Cost-Effective Method of Aerosolizing Dry Powdered Nanoparticles. Aerosol Science and Technology. 47 (11), 1267-1275 (2013).
  38. Blank, F., Rothen-Rutishauser, B. M., Schurch, S., Gehr, P. An Optimized In Vitro Model of the Respiratory Tract Wall to Study Particle Cell Interactions. Journal of Aerosol Medicine. 19 (3), 392-405 (2006).
  39. Laboratory, N. C. . NCL Method GTA-2 HEP G2 Hepatocarcinoma Cytotoxicity Assay. (November), 1-9 (2015).
  40. Kim, J. S., Peters, T. M., O’Shaughnessy, P. T., Adamcakova-Dodd, A., Thorne, P. S. Validation of an in vitro exposure system for toxicity assessment of air-delivered nanomaterials. Toxicology in Vitro. 27 (1), 164-173 (2013).
  41. Mertes, P., et al. A compact and portable deposition chamber to study nanoparticles in air-exposed tissue. Journal of aerosol medicine and pulmonary drug delivery. 26, 228-235 (2013).
  42. Panas, A., et al. Silica nanoparticles are less toxic to human lung cells when deposited at the air-liquid interface compared to conventional submerged exposure. Beilstein Journal of Nanotechnology. 5, 1590-1602 (2014).
  43. Zavala, J., et al. Regulating temperature and relative humidity in air-liquid interface in vitro systems eliminates cytotoxicity resulting from control air exposures. Toxicology Research. 6, 448-459 (2017).
  44. Jing, X., Park, J. H., Peters, T. M., Thorne, P. S. Toxicity of copper oxide nanoparticles in lung epithelial cells exposed at the air – liquid interface compared with in vivo assessment. TOXICOLOGY IN VITRO. 29 (3), 502-511 (2015).
  45. Bitterle, E., et al. Dose-controlled exposure of A549 epithelial cells at the air-liquid interface to airborne ultrafine carbonaceous particles. Chemosphere. 65, 1784-1790 (2006).
  46. Steinritz, D., et al. Use of the Cultex Radial Flow System as an in vitro exposure method to assess acute pulmonary toxicity of fine dusts and nanoparticles with special focus on the intra- and inter-laboratory reproducibility. Chemico-Biological Interactions. 206 (3), 479-490 (2013).
  47. Cronholm, P., et al. Intracellular uptake and toxicity of Ag and CuO nanoparticles: A comparison between nanoparticles and their corresponding metal ions. Small. 9 (7), 970-982 (2013).
  48. Cronholm, P., Midander, K., Karlsson, H. L., Elihn, K., Wallinder, I. O., Möller, L. Effect of sonication and serum proteins on copper release from copper nanoparticles and the toxicity towards lung epithelial cells. Nanotoxicology. 5 (2), 269-281 (2011).
  49. Midander, K., et al. Surface characteristics, copper release, and toxicity of nano- and micrometer-sized copper and copper(ll) oxide particles: A cross-disciplinary study. Small. 5 (3), 389-399 (2009).
check_url/es/58916?article_type=t

Play Video

Citar este artículo
Secondo, L. E., Wygal, N. J., Lewinski, N. A. A New Portable In Vitro Exposure Cassette for Aerosol Sampling. J. Vis. Exp. (144), e58916, doi:10.3791/58916 (2019).

View Video