Summary

חדש נייד במבחנה חשיפה קלטת לדיגום אירוסול

Published: February 22, 2019
doi:

Summary

כאן, אנו מציגים פרוטוקול כדי לבצע חשיפות תרסיס סלולרי נייד ולמדוד את תגובת תאי. השיטה משתמשת בתאים, גדל הממשק אוויר נוזלי, מחקה ויוו פיזיולוגיה. תגובה תאית nanoparticle נחושת אירוסולים נצפתה כמו לחץ חימצוני באמצעות הדור מינים חמצן תגובתי cytotoxicity כמו שחרור לקטט דהידרוגנאז.

Abstract

פרוטוקול זה מציג במבחנה חשיפה מערכת חדשה, מסוגל להיות שחוקים, כולל אפיון והביצועים שלו. ממשק אוויר נוזלי (עלי) במבחנה חשיפה מערכות לעיתים קרובות מגושם, יצירת תחבורה שדה ומבצע במקור של פליטת או בתוך האזור נשימה קשה וגדולים. דרך המזעור של מערכות אלה, ניתן להביא את המעבדה לשדה, לזירוז זמן עיבוד ואספקת שיטה מתאימה יותר חשיפה זה אינו משנה את תרסיס לפני פנייה אל התאים. הנייד במבחנה חשיפה קלטת (PIVEC), מסתגל קלטת מסנן 37 מ מ כדי לאפשר במבחנה רעילות בדיקות מחוץ סביבה מעבדה מסורתיים. PIVEC התאפיינה באמצעות שלושה גדלים של חלקיקים נחושת כדי לקבוע יעילות התצהיר בהתבסס על gravimetric ניתוח ריכוז מספר החלקיקים. Cytotoxicity הראשונית הניסויים בוצעו עם תאי הריאות חשופות כדי לקבוע את היכולת של המערכת הפקדת חלקיקים תוך שמירה על התא הכדאיות. PIVEC מספק יעילות דומה או מוגבר התצהיר בהשוואת להתקני זרימה בניצב זמין במבחנה חשיפה. למרות התפוקה דגימה נמוך יותר, גודל קטן נותן כמה יתרונות ה הנוכחי במבחנה עלי חשיפה מערכות. אלה כוללים את היכולת להיות משוחק לניטור אישי, ניידות מהמעבדה כדי מקור פליטה, ואת האפשרות שיבנו מערכות מרובות עבור רזולוציה מרחבית תוך שמירה על משתמש התחתון עולה. PIVEC הוא מסוגל איסוף אירוסולים בשדה, בתוך האזור נשימה אל אוויר-לממשק, במבחנה מודל מערכת.

Introduction

דגימה אישי תוך שימוש בטכניקות במבחנה יכול לספק מידע מקיף על האפקטים הביולוגיים של אירוסולים במקום העבודה. 1 חשיפות מזהמים באוויר כוללים חשיפות הכימיקל עצמו, את הדגימות שנאספו אוויר, בתנאים המשוקע שבו הגז היא הציגה התליה תא, חשיפות לסירוגין באמצעות מכשיר כמו כיסא נדנדה, או ישירה חשיפות-הממשק אוויר נוזלי (עלי). 2 רבים של טכניקות אלה מבוצעים עם תאים גדל ההשעיה או האוסף של דוגמאות לפני החשיפה, שכל אחד מהם יכול להשפיע על המחקר רעילות עקב שינויים פוטנציאליים בתרסיס. 3 כדי למנוע שינויים אלה, המעבדה ניתן להביא לשדה באמצעות מספר במבחנה עלי תרבות החשיפה מערכות המשמשות בספרות,4,5,6,7, 8,9,10,11,12,13 . עם זאת, מעטים הם זמינים מסחרית. 8 , 9 , 12 מערכות אלה לעיתים קרובות מגושם, במיוחד כאשר כולל מכשירים לווסת טמפרטורה, לחות של הסביבה התאית, קצב הזרימה של מדגם בתרסיס. באמצעות את PIVEC, תרסיס חשיפות ניתן לבצע מחוץ סביבה מעבדה מסורתי או בתוך האזור הנשימה בזמן מחקה שאיפה תנאים.

הקביעה של תרסיס התצהיר במבחנה חשובה החקירה של השפעות בריאותיות כתוצאה מהשאיפה. אזור הנשימה, שטחה של 30 ס מ הפה והאף,14 חיוני להבנת את החשיפה חלקיקים ולשם קישור בין האפקטים הביולוגיים של הריאות. 2 לעתים קרובות, התצהיר על תאים מוגדר על יעילות התצהיר, החלקיקים הנמסרים, נלקח על ידי התאים מחולק החלקיקים מנוהל מערכת ה-6,15 או על בסיס המוני של כמויות זהה. 4 , 16 השיטות למדידת אירוסולים באזור נשימה הן מסנן המבוסס, לכידת חלקיקי על פני תקופה דגימה נתון ושימוש המסננים לערוך בדיקה נוספת. 17 ניטור אישי מחייב מערכת קטנה שמגיע עם עסקת החליפין של דגימות פחות.

קיימות גישות רבות כדי לקבוע את ההשפעות הבריאותיות מחשיפה תרסיס. המודל עלי מאפשר בתרסיס להינתן ישירות לתאים באוויר כמו תרחיש חשיפה אמיתית, אך היא חסכונית יותר, פחות זמן אינטנסיבי יותר ויוו לומד תוך כדי לחקות את המחסומים אוויר נוזלי כגון העיניים, העור והריאות. ריאות תאים גדל את עלי יש את היכולת ליצור שכבה מכשול מקוטב,18,19 אשר מייצרת תכונות פיזיולוגיות הדומות ויוו ריאות האפיתל, כולל ייצור ריר, חומרים פעילי שטח ספציפי שורות תאים הסמפונות או מכתשי, cilia מכות, צמתי צר19 , קיטוב20 ותא19,. 18 משתנה כגון אלה יכולים להשפיע על התגובה התאית נמדד מחקרי רעילות. 21 . בנוסף, עלי במבחנה דגם תוצאות הם לעתים קרובות יותר רגישה תאים נחשפו באמצעות מודלים ההשעיה22 ואין מסוגלות כדי דגם חריפה ויוו שאיפת רעילות. 23 , 24 . לפיכך, מערכת חשיפה עלי כי הוא מסוגל לבצע מדידות בתוך האזור נשימה היא צעד הבא טבעי.

על ידי חשיפת התאים תרסיס ישירות על מקור פליטה, חקירת ההשפעות של גזים, תרכובות נדיפות למחצה, וכל חלקיקי מעורב בתערובת מתרחשת. כאשר התערובת נאסף על מסנן, תרכובות נדיפות של גזים לא נתפס, לא יכול לחקור את כל התערובת. בנוסף, שיחזור של חלקיקי אבקה או השעיה נוזלי יכול להוביל צבירת או אינטראקציות חלקיקים-נוזל, כגון פירוק, ההשעיה נוזלי. 25 , 26 כאשר חלקיקי אירוסול מתווספים הנוזל, קיים פוטנציאל גבוה יותר עבור הצטברות,25,27 היווצרות של חלבונים קורונה,28 או אינטראקציה עם תרכובות בתוך הנוזל, אשר יכול להשפיע על התצהיר, להשפיע על התגובה הביולוגית. 29 , 30

חשיפה-עלי מבוססת על שלושה פרופילים תרסיס הראשי, ענן שיקוע, במקביל זרימה וזרימה בניצב. ענן להתיישב, בשימוש על ידי חשיפה תא ממשק אוויר נוזלי (אליס),4 היא מערכת אצווה שבו חלקיקים להפקיד באמצעות כוח הכבידה, diffusional מסתדר כמו בתרסיס היא כאל יחידה אחת. זרם מקבילים, המשמש את תרסיס אלקטרוסטטית במבחנה חשיפה מערכת (המרזבים)5 ו Multiculture חשיפה קאמרית (MEC) II,6 מאפשר התצהיר באמצעות התוספת של תנועה בראונית דרך הפרופיל זרימה. זרימת בניצב, בשימוש על ידי microsprayer,7 ננו תרסיס קאמרית In-Vitro רעילות (NACIVT),11 , מסחרי עלי מערכות8,9,10,12, מוסיף את פקק של חלקיקים בתוך אזור התצהיר. רבות ממערכות אלה חשיפה וגדולים מגושם, הדורשים מערכות עודף עבור תרסיס מראש מיזוג, משאבות הזרימה, או אפילו חימום לשכות דגירה של תאים. גודל גדול זה מקטין הניידות של המערכת. במקום דגימה ישירות על מקור פליטה, מערכות אלו לעתים קרובות יש דוגמאות הובא אירוסולים מעבדה או מודל שנוצר לצורך ניתוח. אסור לאבד את המורכבות בתרסיס הנפלט בתרגום מן השדה למעבדה. PIVEC הוא קטן יותר מאשר המערכות הקיימות, עם שטח פני השטח החיצוניים של 460 ס מ2 , במשקל 60 גרם בלבד, עם חום ולחות שולבו מערכת המאפשרת להתקן נייד במיוחד. ירידה בגודל ובמשקל לאפשר למערכת להיות שחוקים או נלקח למקור של חשיפה, המתיר דגימה ישירה.

גודלו של מערכות החשיפה הנוכחית גם פוחתת היכולת לבצע דגימה לחקור את מרחבי מעברי צבע בריכוזים. החלטה זו היא המפתח בעת החלטה על תופעות רעילות של פוטנציאל סביבתיים רבים, סיכון מקצועי כגון פליטה לרכבים חלקיקי החומר או מקום העבודה פעילויות שבו מתרחשת חשוד. מיד לאחר פליטה, הופך שם שונות מרחבית בריכוז החלקיקים. זה גדל עם הזמן כפי החלקיקים לפזר ברחבי האטמוספירה ולשנות אפקטים אלה בהתבסס על תנאי הסביבה, כגון טמפרטורה, לחץ, רוח, שמש. חלקיקים יכולים להתחיל בגיל, נישחק גם פעם הנפלט31,32 , פיזור המחירים המושפעים הטופוגרפיה; ריכוז גבוה ניתן למצוא קניונים ומנהרות, שבו פיזור האפקטים הם האטה, ריכוז נמוך יותר ניתן למצוא איפה יש אזור גדול עבור פיזור. 33 שינויים אלה של פיזור המחירים יכול להיות השפעות משמעותיות על בריאות האדם, ניתן לראות כאשר משווים את המספר של אסתמה מבוגרים המתגוררים עירוני לעומת הכפרי. 34 בעוד מערכות חשיפה רבות לספק דוגמאות מרובים בבת אחת, מערכות מרובות נחוצים עם שפע של ציוד גדול לביצוע רזולוציה מרחבית.

על ידי הבאת מהמעבדה לשדה, הניתנות להפחתה הזמן של ניתוח על-ידי שימוש את כל התא חיישן. בעקבות מנגנונים ביולוגיים ידוע ונקודות קצה יכול לסייע בקביעת הרכב תרסיס ואת גודל. בשל שיטות הסיווג איטי, לרבות בשחרור ליחה, phagocytosis רוברטסונית, חלקיקים אלה לעיתים קרובות אינטראקציה עם תאים כ ימים עד שבועות3 יוצר סטרס חמצוני, דלקת, אפילו מוות של תאים. אלה נקודות קצה ביולוגי יכול להיות נקודות המוצא עבור תוצאה שלילית מסלולים עבור מחלות לב וכלי דם או מחלת ריאות חסימתית כרונית. בנוסף, Wiemenn. et al. לבצע מגוון של מבחני במבחנה כדי להשוות ערכים ספרות לטווח קצר ויוו שאיפת רעילות. 35 In vivo התגובה היה חזה עם שניים מתוך ארבעת תוצאות חיוביות של בדיקות cytotoxicity באמצעות שחרור לקטט דהידרוגנאז, סטרס חמצוני של הפחתת גלוטתיון היווצרות מימן על-חמצני ושחרור, דלקת אפשרית מן הגן הגידול נקרוזה מקדם אלפא. מתוך עשר nanosized תחמוצות מתכת נבדק, שש נבדק כמו פעיל (טיטניום אוקסיד, תחמוצת אבץ ו תחמוצת צריום שונות ארבעה) באמצעות חשיפות בתוך חוץ גופית עם אישור ויוו

על מנת לחקור את ההשפעות של אירוסולים בסביבה תעסוקתית, המעבדה שלנו פיתח את PIVEC עבור חשיפות בשטח. בנוסף, PIVEC יכול להיות משוחק על דגימה אישי לפקח ולחקור שאיפת חשיפה כמו קלטת מסנן36 37 mm או מערכות מרובות ניתן להשיג רזולוציה מרחבית בתוך אזור נתון. ב פרוטוקול זה, אפיון ושימוש PIVEC הנדונה. לאחר החשיפה, השפעות ביולוגיות הם נצפו דרך מבחני cytotoxicity.

Protocol

מפעילי חייב ללבוש ציוד מגן אישי (למשל חלוק, כפפות, משקפי מגן) בעת ביצוע שלבים 1, 2, 3, 5 ו- 6. 1. הכנה של חומרים להכין חומרים עבור מכלול המערכת ולהבטיח חשיפה הדיר. ודא שימוש חדש 70% אתנול ניקה ¼” הקוטר הפנימי מוליך צנור ו- ¼” הקוטר החיצוני למחברי או עבור מכלול המערכת…

Representative Results

תעסוקתית במבחנה הרעלים כוללת שמירה על יכולת הקיום הסלולר תוך כדי ביצוע החשיפה תרסיס. מערכת PIVEC מוצג באיור 2, לרבות הטמפרטורה, בקרת לחות, את PIVEC שחוקים. הטמפרטורה נשמר באמצעות תנור resistive המופעלים באמצעות סוללות והגדילה תרסיס humidified באמצעות לחות טבעי דרך …

Discussion

מסנן קלטות מספקות שיטה פשוטה, זולה של איסוף אירוסולים באזור נשימה; עם זאת, תרסיס מופק מסננים לא מייצגים את תרסיס כולו (כלומר גזים שיכללו חומרים נדיפים, חלקיקים) ודוגמאות כתוצאה מכך להגביל את ההערכה של השפעות ביולוגיות קשורים. באמצעות העיצוב הראשוני בקלטת מסנן 37 mm, PIVEC נועד לשמור על ניידות ומ…

Divulgaciones

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

המחברים רוצה להודות בוריס סולומונוב, החנות המכונה החדשנות של חבר העמים הבריטי וירג’יניה לעזרה עם שטנץ מהירה המכשיר. המחברים רוצה גם להודות Cristian רומרו-פואנטס של קבוצת Lewinski, ד ר Vitaliy Avrutin, ד ר דמיטרי Pestov, וירג’יניה קהיליה ננו הליבה אפיון המתקן על עזרתם עם איפיון חלקיקים. עבודה זו נתמכה על ידי קרנות הפעלה סופק לו ד ר Lewinski על ידי המכללה האקדמית להנדסה באוניברסיטת וירג’יניה.

Materials

Scanning mobility particle sizer (SMPS) TSI, Inc. 3910 NanoSMPS
Optical particle sizer (OPS) TSI, Inc. 3330
Stainless Steel Pipe, 4" Long McMaster-Carr 4830K116 Standard-Wall 304/304L, Threaded on Both Ends, 1/8 Pipe Size
Brass Ball Valve with Lever Handle McMaster-Carr 4112T12 Compact High-Pressure Rating, 1/8 NPT Female
Steel Pipe, 2" Long McMaster-Carr 7753K121 Standard Wall, Threaded on One End, 1/8 Pipe Size
HEPA filter GE Healthcare 09-744-12 HEPA-Cap Disposable Air Filtration Capsule
Vacuum Generator PISCO USA VCH10-018C
PIVEC VCU For design please contact authors
Resistive heater
1/4" barbed connectors Zefon International, Inc. 459743
Porous tubing Scientific Commodities, Inc. BB2062-1814A Hydrophilic 10 um pores
Battery power bank
Cell culture insert Fisherbrand 353095 24 well plate insert
Filter Forceps Fisherbrand 09-753-50
Transfer Pipette ThermoScientific 13-711-27
Glass Fiber Filters SKC 225-7 Binder-Free Type AE Filter 37 MM 1.00 um pore
Ultra Micro Balance A&D BM-22 Housed in environmental chamber
37 mm filter cassette SKC 225-3250 Filter Cassette Blank, 37 mm, Clear Styrene
Variable flow vacuum pump SKC 220-5000TC AirChek TOUCH, 5 to 5000 mL/min
Copper Particles U.S. Research Materials, Inc. US1090 40 nm
Copper Particles U.S. Research Materials, Inc. US1088 100 nm
Copper Particles U.S. Research Materials, Inc. US1117M 800 nm

Referencias

  1. Lewinski, N. A., Secondo, L. E., Ferri, J. K. Enabling Real-Time Hazard Assessment at the Workplace Enabling Real-Time Hazard Assessment at the Workplace. 14th Global Congress on Process Safety. , 1-9 (2018).
  2. Bakand, S., Winder, C., Khalil, C., Hayes, A. Toxicity assessment of industrial chemicals and airborne contaminants: transition from in vivo to in vitro test methods: a review. Inhalation Toxicology. 17, 775-787 (2005).
  3. Bakand, S., Hayes, A. Troubleshooting methods for toxicity testing of airborne chemicals in vitro. Journal of Pharmacological and Toxicological Methods. 61 (2), 76-85 (2010).
  4. Lenz, A. G., et al. A dose-controlled system for air-liquid interface cell exposure and application to zinc oxide nanoparticles. Particle and Fibre Toxicology. 6, 32 (2009).
  5. de Bruijne, K., et al. Design and testing of Electrostatic Aerosol in Vitro Exposure System (EAVES): an alternative exposure system for particles. Inhalation Toxicology. 21, 91-101 (2009).
  6. Asimakopoulou, A., Daskalos, E., Lewinski, N., Riediker, M., Papaioannou, E., Konstandopoulos, A. G. Development of a dose-controlled multiculture cell exposure chamber for efficient delivery of airborne and engineered nanoparticles. Journal of Physics: Conference. 429, 1-10 (2013).
  7. Grigg, J., et al. DNA damage of macrophages at an air-tissue interface induced by metal nanoparticles Macrophage. Nanotoxicology. 3 (4), 348-354 (2009).
  8. Aufderheide, M., Knebel, J. W., Ritter, D. An improved in vitro model for testing the pulmonary toxicity of complex mixtures such as cigarette smoke. Experimental and Toxicologic Pathology. 55, 51-57 (2003).
  9. Aufderheide, M., Halter, B., Möhle, N., Hochrainer, D. The CULTEX RFS: A comprehensive technical approach for the in vitro exposure of airway epithelial cells to the particulate matter at the air-liquid interface. BioMed Research International. 2013 (1), 1-15 (2013).
  10. Tippe, A., Heinzmann, U., Roth, C. Deposition of fine and ultrafine aerosol particles during exposure at the air/cell interface. Journal of Aerosol Science. 33, 207-218 (2002).
  11. Savi, M., et al. A novel exposure system for the efficient and controlled deposition of aerosol particles onto cell cultures. Environmental Science and Technology. 42, 5667-5674 (2008).
  12. Fröhlich, E., et al. Comparison of two in vitro systems to assess cellular effects of nanoparticles-containing aerosols. Toxicology in Vitro. 27, 409-417 (2013).
  13. Frijns, E., et al. A Novel Exposure System Termed NAVETTA for in Vitro Laminar Flow Electrodeposition of Nanoaerosol and Evaluation of Immune Effects in Human Lung Reporter Cells. Environmental Science and Technology. 51 (9), 5259-5269 (2017).
  14. Vincent, J. H. . Aerosol Science for Industrial Hygienists. , (1995).
  15. Fujitani, Y., Sugaya, Y., Hashiguchi, M., Furuyama, A., Hirano, S., Takami, A. Particle deposition efficiency at air-liquid interface of a cell exposure chamber. Journal of Aerosol Science. 81, 90-99 (2015).
  16. Elihn, K., Cronholm, P., Karlsson, H. L., Midander, K., Odnevall Wallinder, I., Möller, L. Cellular Dose of Partly Soluble Cu Particle Aerosols at the Air-Liquid Interface Using an. In Vitro Lung Cell Exposure System. Journal of Aerosol Medicine and Pulmonary Drug Delivery. 26 (2), 84-93 (2013).
  17. . . Aerosols Handbook Measurement, Dosimetry, and Health Effects. , (2005).
  18. de Souza Carvalho, C., Daum, N., Lehr, C. M. Carrier interactions with the biological barriers of the lung: Advanced in vitro models and challenges for pulmonary drug delivery. Advanced Drug Delivery Reviews. 75, 129-140 (2014).
  19. Fattal, E., Grabowski, N., Mura, S., Vergnaud, J., Tsapis, N., Hillaireau, H. Lung Toxicity of Biodegradable Nanoparticles. Journal of Biomedical Nanotechnology. 10 (10), 2852-2864 (2014).
  20. Klein, S. G., Serchi, T., Hoffmann, L., Blömeke, B., Gutleb, A. C. An improved 3D tetraculture system mimicking the cellular organisation at the alveolar barrier to study the potential toxic effects of particles on the lung. Particle and Fibre Toxicology. 10, 31 (2013).
  21. Oberdörster, G., et al. Principles for characterizing the potential human health effects from exposure to nanomaterials: elements of a screening strategy. Particle and Fibre Toxicology. 2, 8 (2005).
  22. Secondo, L. E., Liu, N. J., Lewinski, N. A. Methodological considerations when conducting in vitro, air-liquid interface exposures to engineered nanoparticle aerosols. Critical Reviews in Toxicology. , 1-32 (2016).
  23. Sayes, C. M., Reed, K. L., Warheit, D. B. Assessing toxicology of fine and nanoparticles: Comparing in vitro measurements to in vivo pulmonary toxicity profiles. Toxicological Sciences. 97 (1), 163-180 (2007).
  24. Maier, K. L., et al. Health effects of ambient particulate matter–biological mechanisms and inflammatory responses to in vitro and in vivo particle exposures. Inhalation Toxicology. 20 (May 2007), 319-337 (2008).
  25. Cohen, J. M., Teeguarden, J. G., Demokritou, P. An integrated approach for the in vitro dosimetry of engineered nanomaterials. Particle and Fibre Toxicology. 11 (1), 20 (2014).
  26. Deloid, G., et al. Estimating the effective density of engineered nanomaterials for in vitro dosimetry. Nature Communications. 5, 3514 (2014).
  27. Pal, A. K., Bello, D., Cohen, J., Demokritou, P. Implications of in vitro dosimetry on toxicological ranking of low aspect ratio engineered nanomaterials. Nanotoxicology. , 1-15 (2015).
  28. Walkey, C., et al. Protein corona fingerprinting predicts the cellular interaction of gold and silver nanoparticles. ACS Nano. 8 (3), 2439-2455 (2014).
  29. Raemy, D. O., et al. Effects of flame made zinc oxide particles in human lung cells – a comparison of aerosol and suspension exposures. Particle and Fibre Toxicology. 9 (1), 33 (2012).
  30. Holder, A. L., Lucas, D., Goth-goldstein, R., Koshland, C. P. Cellular response to diesel exhaust particles strongly depends on the exposure method. Toxicological Sciences. 103 (1), 108-115 (2008).
  31. Sanderson, P., et al. Characterisation of iron-rich atmospheric submicrometre particles in the roadside environment. Atmospheric Environment. 140. , 167-175 (2016).
  32. Burtscher, H. Physical characterization of particulate emissions from diesel engines: A review. Journal of Aerosol Science. 36 (7), 896-932 (2005).
  33. Ris, C. U.S. EPA health assessment for diesel engine exhaust: a review. Inhalation Toxicology. 19 (Suppl. 1), 229-239 (2007).
  34. Jie, Y., Isa, Z. M., Jie, X., Ju, Z. L., Ismail, N. H. Urban vs. Rural Factors That Affect Adult Asthma. Reviews of Environmental Contamination and Toxicology. 226, (2013).
  35. Wiemann, M., Vennemann, A., Sauer, U. G., Wiench, K., Ma-Hock, L., Landsiedel, R. An in vitro alveolar macrophage assay for predicting the short-term inhalation toxicity of nanomaterials. Journal of Nanobiotechnology. 14 (1), 16 (2016).
  36. Kenny, L. C., et al. A collaborative european study of personal inhalable aerosol sampler performance. Annals of Occupational Hygiene. 41 (2), 135-153 (1997).
  37. Tiwari, A. J., Fields, C. G., Marr, L. C. A Cost-Effective Method of Aerosolizing Dry Powdered Nanoparticles. Aerosol Science and Technology. 47 (11), 1267-1275 (2013).
  38. Blank, F., Rothen-Rutishauser, B. M., Schurch, S., Gehr, P. An Optimized In Vitro Model of the Respiratory Tract Wall to Study Particle Cell Interactions. Journal of Aerosol Medicine. 19 (3), 392-405 (2006).
  39. Laboratory, N. C. . NCL Method GTA-2 HEP G2 Hepatocarcinoma Cytotoxicity Assay. (November), 1-9 (2015).
  40. Kim, J. S., Peters, T. M., O’Shaughnessy, P. T., Adamcakova-Dodd, A., Thorne, P. S. Validation of an in vitro exposure system for toxicity assessment of air-delivered nanomaterials. Toxicology in Vitro. 27 (1), 164-173 (2013).
  41. Mertes, P., et al. A compact and portable deposition chamber to study nanoparticles in air-exposed tissue. Journal of aerosol medicine and pulmonary drug delivery. 26, 228-235 (2013).
  42. Panas, A., et al. Silica nanoparticles are less toxic to human lung cells when deposited at the air-liquid interface compared to conventional submerged exposure. Beilstein Journal of Nanotechnology. 5, 1590-1602 (2014).
  43. Zavala, J., et al. Regulating temperature and relative humidity in air-liquid interface in vitro systems eliminates cytotoxicity resulting from control air exposures. Toxicology Research. 6, 448-459 (2017).
  44. Jing, X., Park, J. H., Peters, T. M., Thorne, P. S. Toxicity of copper oxide nanoparticles in lung epithelial cells exposed at the air – liquid interface compared with in vivo assessment. TOXICOLOGY IN VITRO. 29 (3), 502-511 (2015).
  45. Bitterle, E., et al. Dose-controlled exposure of A549 epithelial cells at the air-liquid interface to airborne ultrafine carbonaceous particles. Chemosphere. 65, 1784-1790 (2006).
  46. Steinritz, D., et al. Use of the Cultex Radial Flow System as an in vitro exposure method to assess acute pulmonary toxicity of fine dusts and nanoparticles with special focus on the intra- and inter-laboratory reproducibility. Chemico-Biological Interactions. 206 (3), 479-490 (2013).
  47. Cronholm, P., et al. Intracellular uptake and toxicity of Ag and CuO nanoparticles: A comparison between nanoparticles and their corresponding metal ions. Small. 9 (7), 970-982 (2013).
  48. Cronholm, P., Midander, K., Karlsson, H. L., Elihn, K., Wallinder, I. O., Möller, L. Effect of sonication and serum proteins on copper release from copper nanoparticles and the toxicity towards lung epithelial cells. Nanotoxicology. 5 (2), 269-281 (2011).
  49. Midander, K., et al. Surface characteristics, copper release, and toxicity of nano- and micrometer-sized copper and copper(ll) oxide particles: A cross-disciplinary study. Small. 5 (3), 389-399 (2009).
check_url/es/58916?article_type=t

Play Video

Citar este artículo
Secondo, L. E., Wygal, N. J., Lewinski, N. A. A New Portable In Vitro Exposure Cassette for Aerosol Sampling. J. Vis. Exp. (144), e58916, doi:10.3791/58916 (2019).

View Video