Intratraqueal inoculação de Fischer 344 ratos com Francisella tularensis

F. tularensis (Ft) faz com que a doença humana, tularemia. Quando as bactérias são adquiridas através da rota pulmonar, isto leva a tularemia pneumônica, que tem alta taxa de morbidade e mortalidade¹. F. tularensis é considerada um agente de ameaça biológica devido ao perigo associado com formas de aerossol e não há atualmente nenhuma vacina aprovada para uso humano nos EUA Um esforço intenso está em andamento desenvolver vacinas e medidas terapêuticas contra tularemia pneumônica, para proteger a população humana contra o uso ilícito desta ameaça biológica bacteriana.

Muita da pesquisa de tularemia centrou-se no modelo do rato, devido a extrema sensibilidade de ratos para F. tularensis infecção e a prevalência dos reagentes. No entanto, os ratos têm provado para ser um modelo difícil para desenvolvimento de vacinas, devido à dificuldade de demonstrar a eficácia da vacina neste modelo². Recentemente, o rato Fischer 344 foi desenvolvido como um modelo para tularemia vacina desenvolvimento³. A sensibilidade do rato Fischer 344 para várias subespécies de F. tularensis imita a sensibilidade humana⁴, e ratos podem ser protegidos contra F. tularensis desafio pulmonar por vacinação com uma cepa de vacina viva conhecida para proteger os seres humanos^5,6,7. Porque o rato Fischer 344 modelos algumas características de F. tularensis infecção dos seres humanos, pode ser um modelo extremamente útil para o desenvolvimento de uma vacina que protege contra pulmonar F. tularensis exposição.

Precisa de uma vacina eficaz para proteger os seres humanos contra a exposição pulmonar a F. tularensis. A mais provável exposição pulmonar como arma F. tularensis seria aerossol bactéria inalada para os pulmões,⁸. No entanto, geração de aerossol de F. tularensis é perigoso e complicado e requer equipamento especializado e contenção. Uma rota alternativa de exposição pulmonar em ratos que é talvez mais adaptável para vários laboratórios falta equipamento especializado é via intratraqueal inoculação⁶. Esta técnica utiliza um laringoscópio para a colocação de um cateter dentro da traqueia de um rato anestesiado. Colocação dentro da traqueia, ao invés do esôfago, é verificada por um dispositivo simples que visualiza o fluxo de ar dos pulmões. F. tularensis é posteriormente entregue aos pulmões através do cateter pela administração com uma seringa, seguida pela introdução de ar dentro do cateter para assegurar a entrega pulmonar das bactérias. Em contraste, Jemski⁵ anteriormente relatados que F. tularensis inoculada em ratos Fischer 344 através da rota intranasal não poderiam ser cultivadas dos pulmões até pós-inoculação de 3 dias, indicando a inoculação intranasal em ratos que Não resultado na entrega direta de bactérias para os pulmões.

Agente selecione formas de F. tularensis (F. tularensis subsp. tularensis, F. tularensis subsp. holarctica) requerem procedimentos de contenção de biossegurança nível 3 (BSL3), que impediriam a videografia. No entanto, F. novicida (Fn) está isenta do status de agente selecione devido a sua avirulence em seres humanos saudáveis e pode ser utilizado com segurança em condições de biossegurança nível 2 (BSL2)^9,10. Além disso, a Fn serve como base para as vacinas vivas atenuadas que pode proteger contra a exposição pulmonar de F. tularensis quando entregues via intratraqueal inoculação^11,12,13. A técnica apresentada aqui permite o estudo de infecções que ocorrem através da rota pulmonar utilizando ratos como um modelo para os seres humanos. Esta técnica pode ser realizada sem a necessidade de equipamento especializado de geração de aerossol. FN foi usado para as técnicas filmadas aqui.