Summary

Kutane Leishmaniose in der Rückenhaut von Hamstern: ein nützliches Modell für das Screening von Drogen leishmanientötende

Published: April 21, 2012
doi:

Summary

Optimierung der experimentellen Hamster-Modell für kutane Leishmaniose durch intradermale Injektion von<em> Leishmania</em> Promastigoten an der dorsalen Haut. Dieser Ansatz ist sinnvoll, während der Inokulation, Follow-up, Charakterisierung von Läsionen, die Anwendung von Behandlungen und den Erhalt von klinischen Proben. Locomotion, die Suche nach Nahrung und Wasser, sind Spiel-und sozialen Aktivitäten erhalten.

Abstract

Traditionell werden Hamster experimentell in der Schnauze oder dem Fußballen geimpft. Doch in diesen Seiten ein Geschwür nicht immer auftritt, ist die Messung der Größe der Läsion ein hartes Vorgehen und Tieren zeigen, Schwierigkeiten zu essen, atmen und weil der Läsion zu bewegen. Um die Hamster-Modell für Haut-Leishmaniose, jungen erwachsenen männlichen und weiblichen Goldhamster zu optimieren (Mesocricetus auratus) wurden intradermal an der dorsalen Haut mit 1 bis 1,5 x l0 7 Promastigoten der Leishmania-Spezies und das Fortschreiten der später Läsionen injiziert wurden für bis zu bewertenden 16 Wochen nach der Infektion. Der Goldhamster wurde ausgewählt, weil es als das adäquate Modell für Bio-Medikamente gegen Leishmania bewerten, da sie anfälliger für Infektionen durch verschiedene Arten sind. Kutane Infektion von Hamstern kommt es zu chronischen, aber kontrollierte Läsionen, und eine klinische Entwicklung mit ähnliche Symptome wie beim Menschen beobachtet. Deshalb, o die Einrichtungf das Ausmaß der Infektion durch Messen der Größe der Läsion nach Anspruch Bereich der Verdickungen und Geschwüre möglich ist. Dieser Ansatz hat seine Vielseitigkeit und einfache Handhabung bei der Impfung bewiesen, Follow-up und Charakterisierung von typischen Läsionen (Ulzera), Anwendung von Behandlungen durch verschiedene Arten und den Erhalt von klinischen Proben nach unterschiedlichen Behandlungen. Durch die Nutzung dieser Methode die Qualität des tierischen Lebens in Bezug auf Fortbewegung, die Suche nach Nahrung und Wasser, Spiel-und sozialen Aktivitäten isalso erhalten.

Protocol

1. Die Infektion von Hamstern 1. Tiere Inzucht weiblichen und männlichen Goldhamster (Mesocricetus auratus), 6-8 Wochen mit einem Gewicht von 140-160 g verwendet werden. Sie werden mit dem Tierhaus untergebracht, in der temperaturgeführten Unterkunft, gefüttert mit Standard-Nager-Trockenfutter und mit Wasser ad libitum. Alle Verfahren, die Tiere werden von der institutionellen Ethikkommission für Experimentelle Tiere zugelassen. Vor der experimen…

Discussion

Kutane Leishmaniose ist endemisch in den Tropen und Neotropis. Es wird oft als eine Gruppe von Krankheiten aufgrund der vielfältigen Spektrum an klinischen Manifestationen, die von kleinen kutanen Knötchen auf grobe Schleimhautgewebe Zerstörung Bereich bezeichnet. Die meisten verfügbaren Medikamente sind teuer, erfordern lange Behandlungsschemata und immer wirkungsloser werden, erfordern die Entdeckung neuer Medikamente.

Das Maus-Modell ist weit verbreitet, aber einige Nachteile. Ein hoc…

Divulgaciones

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

COLCIENCIAS und dem Zentrum für Entwicklung von Produkten gegen Tropenkrankheiten – – CIDEPRO Diese Studie wurde durch Zuschüsse aus dem Ausschuss für Forschung an der Universität von Antioquia (CODI), der kolumbianischen Instituts für Entwicklung der Wissenschaft und Technologie unterstützt.

Materials

Name of the reagent Tipo Company Catalogue number
Ketamine Reagent Holliday –Scott S.A  
Xilacine Reagent Synthesis  
PBS Reagent GIBCO 14190-136
Digital caliper Equipment Fisher 15-077-958
Giemsa Reagent SIGMA GS1L-1L
Formalin Reagent Nova lab 11273
Paraffin Reagent Pechiney Plastic Packaging PM-996
Haemotoxilin Reagent Nova lab 10870103
Eosin   Nova lab 10870203
Kodak Ektachem dry chemistry Equipment Kodak Ektachem DT-60
meglumine antimoniate Reagent Aventis  
Microscopy Equipment Nikon YS2-T

Referencias

  1. WHO. Control of the leishmaniasis. Report of a Meeting of the WHO Expert Committee on the Control of Leishmaniasis WHO. 949, (2010).
  2. Titus, R. G., Marchand, M., Boon, T., Louis, J. A. A limiting dilution assay for quantifying Leishmania major in tissues of infected mice. Parasite Immunol. 7, 545-555 (1985).
  3. Reynolds, K. M. The Kodak Ektachem dry layer technology for clinical chemistry. Upsala. J. Med. Sci. 91, 143-146 (1986).
  4. Handman, E., Ceredig, R., Mitchell, G. F. Murine cutaneous leishmaniasis: disease patterns in intact and nude mice of various genotypes and examination of some differences between normal and infected macrophages. Australian J. Exp. Biol. Med. Sci. 57, 9-29 (1979).
  5. Hanson, W., Chapman, W., Waits, V., Lovelace, J. Development of Leishmania (Viannia) panamensis lesions and relationship of numbers of amastigotes to lesion area antimony-treated and untreated hamsters. J. Parasitol. 77, 780-783 (1991).
  6. Henao, H. H., Osorio, Y., Saravia, N. G., Gómez, A., Travi, B. Efficacy and toxicity of pentavalentantimonials (Glucantime and Pentostam) in an American cutaneous leishmaniasis animal model: luminometry application. Biomédica. 24, 393-402 (2004).
  7. Travi, B. L., Martinez, J. E., Zea, A. Antimonial treatment of hamsters infected with Leishmania (Viannia) panamensis: assessment of parasitological cure with different therapeutic schedules. Trans. R. Soc. Trop. Med. Hyg. 87, 567-569 (1993).
  8. Hommel, M., jaffe, C. L., Travi, B., Milon, G. Experimental models for leishmaniasis and for testing anti-leishmanial vaccines. Ann. Trop. Med. Parasitol. 89, 55-73 (1995).
  9. Travi, B. L., Osorio, Y., Saravia, N. G. The inflammatory response promotes cutaneous metastasis in hamsters infected with Leishmania (Viannia) panamensis. J. Parasitol. 82, 454-457 (1996).
  10. Travi, B. L., Osorio, Y. Failure of Albendazole as an alternative treatment of cutaneous Leishmaniasis in the hamster model. Memorias Instituto Oswaldo. 93, 515 (1998).
  11. Travi, B. L., Osorio, Y., Melby, P. C., Chandrasekar, B., Arteaga, L., Saravia, N. G. Gender is a major determinant of the clinical evolution and immune response in hamsters infected with Leishmania spp. Infect Immun. 70, 2288-2296 (2002).
  12. Osorio, Y., Melby, P. C., Pirmez, C., Chandrasekar, B., Guarín, N., Travi, B. L. The site of cutaneous infection influences the immunological response and clinical outcome of hamsters infected with Leishmania panamensis. Parasite Immunol. 25, 139-148 (2003).
  13. Osorio, Y., Bonilla, D. L., Peniche, A. G., Melby, P. C., Travi, B. L. Pregnancy enhances the innate immune response in experimental cutaneous leishmaniasis through hormone-modulated nitric oxide production. J. Leukoc. Biol. 83, 1413-1422 (2008).
  14. Espitia, C. M., Zhao, W., Saldarriaga, O., Osorio, Y., Harrison, L. M., Cappello, M., Travi, B. L., Melby, P. C. Duplex real-time reverse transcriptase PCR to determine cytokine mRNA expression in a hamster model of New World cutaneous leishmaniasis. BMC Immunol. 22, 11-31 (2010).

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Citar este artículo
Robledo, S. M., Carrillo, L. M., Daza, A., Restrepo, A. M., Muñoz, D. L., Tobón, J., Murillo, J. D., López, A., Ríos, C., Mesa, C. V., Upegui, Y. A., Valencia-Tobón, A., Mondragón-Shem, K., RodrÍguez, B., Vélez, I. D. Cutaneous Leishmaniasis in the Dorsal Skin of Hamsters: a Useful Model for the Screening of Antileishmanial Drugs. J. Vis. Exp. (62), e3533, doi:10.3791/3533 (2012).

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