Summary

Спинной мозг электрофизиологии II: внеклеточной изготовление электродов Всасывающая

Published: February 20, 2011
doi:

Summary

Демонстрация изготовления и использования внеклеточных электродов всасывания используется для измерения электрофизиологических записей новорожденных грызунов спинного мозга<em> В пробирке</em

Abstract

Развитие нейронных схемотехника и передвижения могут быть изучены с помощью новорожденных грызунов спинного мозга центральной картины генератора (CPG) поведение. Мы демонстрируем метод для изготовления электродов всасывания, которые используются для изучения CPG деятельности, или фиктивной локомоции, в расчлененное грызунов спинного мозга. Грызун спинного мозга находятся в искусственной спинномозговой жидкости и вентральных корешков втягиваются в всасывающего электрода. Электрода построен путем изменения имеющихся в продаже всасывания электрода. Тяжелее серебряной проволоки используется вместо стандартной проволоки дается коммерчески доступных электрода. Стеклянным наконечником на коммерческой электрод заменен пластмассовым наконечником для увеличения долговечности. Мы готовим рисованной электроды и электроды из конкретных размеров трубки, что позволяет согласованность и воспроизводимость. Данные собраны при помощи усилителя и программного обеспечения neurogram приобретения. Записи выполняются на стол воздуха внутри клетки Фарадея для предотвращения механических и электрических помех, соответственно.

Protocol

Электрофизиологические записи изолированных спинного мозга может выявить генетические и развития изменений в нервной системы 1. Ранее мы показали метод препарировать новорожденных мышей спинной мозг 2. Здесь мы представляем метод подготовки всасывания полезных электрод?…

Discussion

Нервная система развития могут быть изучены с помощью изолированного спинного мозга грызунов. В присутствии медиаторов, фиктивный передвижения могут быть сгенерированы из спинного мозга в виде узорной электрической активности 1,3. Эти ритмичные очередей производятся на 0,2 до 0,5 ?…

Divulgaciones

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Сэмюэл Л. Пфафф является профессором в лаборатории экспрессии генов в Солка института биологических исследований и следователь в Медицинского института Говарда Хьюза. Эта работа была поддержана Кристофера и Даны Рив Foundation. Джо Belcovson, Кент Schnoeker и Майк Салливан в мультимедийных ресурсов в Институте Солка оказана помощь с фотографией и редактирования.

Materials

Material Name Tipo Company Catalogue Number Comment
PTFE Sub Lite Wall Tubing (Small tubing)   Zeus 36AWG 0.005”ID x 0.003” Wall (Small Parts) Also available in 0.003” to 0.006”
Large tubing (0.86mm (0.34”))   Clay Adams Brand Intramedic Becton Dickinson and Company 427420 0.86mm (0.34”) O.D. 1.27mm (.050”)
Electrode Barrel   A-M Systems 573000  
Adhesive   JB Weld    
Adhesive: Silicone caulk        
Solder and soldering iron        
Bleach        
Xylene        
Silver wire: 0.010”   A-M Systems    
Insect pins: Austerlitz 0.1mm   Fine Science Tools 26002-10  
Magnetic Stand   Narishige GJ-8  
Micromanipulator   Narishige MN 151  
Miniboard (Headstage)   Grass Industries F-15EB/B1  
Polyview Adaptor Unit   Grass Industries PVA 8  
Bipolar Portable Physiodata Amplifier System   Grass Industries 15LT  
ANALOG TO DIGITAL CARD   National Instruments 6035E  
Air Table; Vibraplane   Kinetic Systems    

Referencias

  1. Gallarda, B. W., Sharpee, T. O., Pfaff, S. L., Alaynick, W. A. Defining rhythmic locomotor burst patterns using a continuous wavelet transform. Ann N Y Acad Sci. 1198, 133-139 (2010).
  2. Meyer, A., Gallarda, B. W., Pfaff, S., Alaynick, W. Spinal cord electrophysiology. J Vis Exp. , (2010).
  3. Gallarda, B. W. Segregation of axial motor and sensory pathways via heterotypic trans-axonal signaling. Science. 320, 233-236 (2008).
  4. Landmesser, L. The development of motor projection patterns in the chick hind limb. J Physiol. 284, 391-414 (1978).
  5. Myers, C. P. Cholinergic input is required during embryonic development to mediate proper assembly of spinal locomotor circuits. Neuron. 46, 37-49 (2005).
  6. Chanin, M. The determination of chloride by use of the silver-silver chloride electrode. Science. 119, 323-324 (1954).
  7. Goulding, M. Circuits controlling vertebrate locomotion: moving in a new direction. Nat Rev Neurosci. 10, 507-518 (2009).

Play Video

Citar este artículo
Garudadri, S., Gallarda, B., Pfaff, S., Alaynick, W. Spinal Cord Electrophysiology II: Extracellular Suction Electrode Fabrication. J. Vis. Exp. (48), e2580, doi:10.3791/2580 (2011).

View Video