Summary

L'uso del flusso gocciolamento e Reattori disco rotante per Staphylococcus aureus Analisi Biofilm

Published: December 27, 2010
doi:

Summary

Protocolli per l'utilizzo aperto biofilm flusso sistema con reattori a goccia e flusso di rotazione del disco reattori sono presentati in dettaglio.

Abstract

La maggior parte dei microbi in natura si pensa di esistere come superficie associata comunità in biofilm 1. Biofilm batterici sono racchiusi all'interno di una matrice e collegato a una superficie di 2. Formazione di biofilm e lo sviluppo sono comunemente studiate in laboratorio utilizzando sistemi batch come micropiastre o di flusso sistemi, come il flusso delle cellule. Queste metodologie sono utili per lo screening di librerie di mutanti e chimiche (micropiastre) 3 o crescente biofilm per la visualizzazione (celle di flusso) 4. Qui vi presentiamo protocolli dettagliati per Staphylococcus aureus in crescita in due ulteriori tipi di biofilm sistema di flusso: il flusso del reattore a goccia biofilm e la rotazione del reattore biofilm disco.

Drip reattori biofilm flusso sono progettati per lo studio dei biofilm cresciuto in condizioni di taglio basso. 5 Il reattore di flusso a goccia si compone di quattro canali di test in parallelo, ciascuno in grado di tenere uno standard microscopio cedola di vetro di dimensioni diapositiva o una lunghezza del catetere o stint. Il reattore di flusso a goccia è ideale per il monitoraggio microsensor, generale studi biofilm, i campioni di biofilm criosezionamento, la produzione di biomassa ad alta, valutazioni materiale medico, e dimora test del dispositivo medico. 6,7,8,9

Il reattore disco rotante è costituito da un disco di teflon che contiene recessi per cedole rimovibile. 10 Il coupon staccabile può in fatto di qualsiasi materiale lavorabile. La parte inferiore del disco rotante contiene una barra magnetica per consentire la rotazione del disco di creare taglio liquido sulla superficie-superficie a filo coupon. L'intero disco contenente 18 tagliandi è posto in un recipiente di vetro 1000 ml reattore braccio laterale. Un supporto crescita liquido viene fatto circolare attraverso la nave mentre il disco viene ruotato da un agitatore magnetico. Le cedole vengono rimossi dal contenitore del reattore e poi raschiato per raccogliere il campione biofilm per ulteriori studi o immagini di microscopia. Reattori disco rotante sono progettate per le valutazioni di laboratorio di efficacia biocida, rimozione biofilm, e le prestazioni di anti-fouling dei materiali. 9,11,12,13

Protocol

1. La goccia di flusso reattore Biofilm Il flusso del reattore a goccia biofilm (disponibile da Technologies Biosurface o versioni progettate su misura di solito può essere fatta da officine meccaniche università, vedi figura 1) è assemblato e autoclave. Assemblea coinvolge coupon apposizione in camere e coperchi della camera di fissaggio. La camera, insieme con il mezzo biofilm (brodo di soia trittico 2 grammi / L di glucosio e 2 grammi / L) e influente tubi nutrienti sono sterilizzati in autoclave. …

Discussion

Biofilm cresciuto nei reattori differenti spesso hanno caratteristiche diverse e ogni reattore ha applicazioni diverse. In questo lavoro, si descrive l'uso di due reattori biofilm: un flusso reattore a goccia biofilm e un reattore disco rotante. Drip reattori di flusso sono utili per la coltivazione a basso biofilm taglio in un aria-liquido e sono adattabili ad una varietà di condizioni. Li troviamo estremamente conveniente per gli studi in cui una grande quantità di biomassa biofilm è auspicabile. Questa configu…

Divulgaciones

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

NIAID concedere K22AI081748.

Materials

Material Name Tipo Company Catalogue Number Comment
Drip Flow Reactors   BioSurface Technologies Corporation DFR 110  
Rotating Disk Reactors   BioSurface Technologies Corporation    

Referencias

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Citar este artículo
Schwartz, K., Stephenson, R., Hernandez, M., Jambang, N., Boles, B. R. The Use of Drip Flow and Rotating Disk Reactors for Staphylococcus aureus Biofilm Analysis. J. Vis. Exp. (46), e2470, doi:10.3791/2470 (2010).

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