该协议涉及非放射性<em>原位</em>杂交程序,使在脊椎动物的大脑薄片,同时识别两个种成绩单,在一个单细胞的决议。
在这里,我们描述了一个双荧光修改后的版本<em>原位</em优化杂交(dFISH)方法检测mRNA的新鲜冰冻脑切片的兴趣。我们的小组已经成功地使用这种方法,研究基因的共同监管。更具体地说,我们使用的dFISH方法,探讨组织的解剖,神经化学物质的属性,和感官体验在中央感官电路的影响,在单细胞分辨率。在小鼠,大鼠和鸣禽脑组织,但该协议已经得到验证,预计将很容易适应其他脊椎动物物种,以及非神经组织的数组。在这部影片中,我们提供详细演示了此过程的主要步骤。
我们使用这个协议来研究脊椎动物的大脑是如何neurochemically和功能组织,并确定如何行为相关的感官刺激的影响在成人大脑 8-10元基因组机械。我们已经成功地使用这种方法在小鼠,大鼠和鸣禽脑组织,但预计此协议将很容易适应从脊椎动物物种的阵列,或许非神经组织得到的脑切片。需要获得可靠的结果和最佳的信号的关键控制已经详细广泛,本集团其他地方11,12 。
The authors have nothing to disclose.
NIH / NIDCD和施密特基金会到RP的赠款支持的工作。
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