Este vídeo descreve um método de microinjeção para o parto de células cancerígenas de mama no espaço perivitelline de embriões transgênicos de zebrafish. Após a incubação, visualizamos o embrião sob um microscópio fluorescente para observar a invasão, disseminação e metástase celular do câncer.
Protocol
1. Imagem e Analisar o Processo Metastático Colete vários embriões anestesiados com uma pipeta Pasteur de ponta larga e transfira-os para o fundo de vidro de um prato de poliestireno. Remova o excesso de água e mantenha uma quantidade limitada de água de ovo. Manipule o embrião em posição com uma ferramenta de laço de cabelo e coloque uma tampa em cima do vidro. Use um microscópio confocal invertido em combinação com a imersão na água ou objetivos secos de long…
Divulgaciones
The authors have nothing to disclose.
Materials
Wide-tip Pasteur pipette (0.5-20 µL)
Eppendorf
F276456I
Confocal microscope
Leica
SP5 STED
Stereo microscope
Leica
MZ16FA
Tg (fli:EGFP) zebrafish strain
Kindly provided by Dr. Ewa SnaarJagalska (Institute of Biology, Leiden University, Leiden, The Netherlands)
zPDX-Analysis of Invasiveness: Investigating Invasive Behavior of Metastatic Cancer Cells in Zebrafish Embryo Xenografts. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20219, doi: (2023).