C. elegans Bewegingstracking: een methode om voortbeweging in wormen te beoordelen
Published: April 30, 2023
Abstract
Bron: Davies, A. G. et al. Een test voor het meten van de effecten van ethanol op de voortbewegingssnelheid van Caenorhabditis elegans. J.Vis. Exp. (2015).
Deze video beschrijft het gebruik van video- en trackingsoftware om wormbewegingen in een arena op te nemen. Het voorbeeldprotocol meet het effect van blootstelling aan ethanol op de voortbeweging van wormen.
Protocol
Het volgende protocol is een uittreksel uit Davies et al, An Assay for Measuring the Effects of Ethanol on the Locomotion Speed of Caenorhabditis elegans, J. Vis. Exp. (2015). Stappen om uit te voeren op de dag voor de test Pluk L4-stadiumwormen op verse Nematodengroeimedium (NGM) platen gezaaid met een gazon van OP50 <em…
Materials
| C. elegans strains | Caenorhabditis Genetics Center | ||
| 60 x 15 mm Petri plates, triple vented | Greiner Bio-One | 628161 | Other plate brands will suffice. |
| NGM agar | Various | NaCl (3 g/L), agar (17 g/L), peptone (2.5 g/L), 1 ml cholesterol (5 mg/ml in ethanol), 1 ml (1 M) MgSO4, 1 ml (1 M) CaCl2, 25 ml (1 M) KPO4, pH=6, 975 ml H2O | |
| Forceps | Various | e.g., Fisher Scientific #10300 | |
| 37 °C Incubator | Various | For drying agar | |
| Copper rings | Plumbmaster | STK#35583 (48 cap thread gasket) | 1.6 cm inner diameter, 1.8 cm outer diameter copper rings |
| 100% ethanol | Various | ||
| Parafilm M | Bemis | PM996 | |
| CCD camera | QImaging | RET-4000R-F-M-12 | This camera has a large field of view. |
| Stereomicroscope with C-mount and 0.5X objective | Leica | MZ6 | Discontinued model, M60 is current equivalent. |
| Light source | Schott | A08923 | 3”x3” backlight for even illumination across the field of view |
| Imaging and tracking software | Media Cybernetics | ImagePro-Plus v6.0-6.3 | Newer versions of the software have tracking functions. |
Citar este artículo
C. elegans Movement Tracking: A Method to Assess Locomotion in Worms. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20163, doi: (2023).