C. elegansNil Kırmızı Boyama : Sabit Hayvanlarda Lipid Damlacıkları Görselleştirmek için Bir Yöntem

Published: April 30, 2023

Abstract

Kaynak: Escorcia, W., vd. Lipid Bolluğunun Nicelleştirilmesi ve Caenorhabditis elegans’ta Lipid Dağılımının Nil Kırmızısı ve Yağ Kırmızısı O Boyama ile Değerlendirilmesi. J. Vis. Exp. (2018).

Bu videoda, Nil Kırmızısı boyası kullanarak lipitleri bütün, sabit solucanlarda lekeleme protokolü açıklanmaktadır.  Lipid damlacıklarının çekirdeğindeki nötr lipitleri özellikle görüntülemek için, lekeli C. elegans’ın yeşil emisyon spektrumunu görüntüleyin.

Protocol

Bu protokol, Escorcia ve ark. 1. Lipitlerin Nil Kırmızısı (NR) Boyanmesi 5 mg/mL NR stok çözeltisinin hazırlanması 500 mL’lik bir şişede, 0 asetonun 200 mL’sine 100 mg NR tozu ekleyin. Işığa maruz kalmamak için şişeyi alüminyum folyo ile örtün. Kullanmadan önce, çözeltiyi karanlıkta 2 saat karıştırın. Uzun süreli kullanım için, NR stok çözeltisini herhangi…

Materials

Imager.M2m Microscope Zeiss n/a Fluorescence microscope
ERC5s camera Axiocam n/a Color-capable
MRm camera Axiocam n/a Fluorescence-capable
Nile red Thermo Fisher N1142 Lipid Stain
Isopropyl Alcohol BDH BDH1133-1LP Fixative solution
Centrifuge 5430 Eppendorf 5428000015 Centrifuge
Tube Rotator VWR 10136-084 Rotator

Play Video

Citar este artículo
Nile Red Staining of C. elegans: A Method to Visualize Lipid Droplets in Fixed Animals. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20134, doi: (2023).

View Video