דרוזופילה בויו הדמיית סידן: שיטה להדמיה תפקודית של פעילות עצבית

Published: April 30, 2023

Abstract

מקור: הנקוק, C. E., ואח ‘. ב Vivo אופטי סידן הדמיה של למידה-induced פלסטיות סינפטית במלנוגאסטר דרוזופילה. ג’יי ויס אקספ. (2019).

וידאו זה מתאר הדמיית סידן vivo בנוירונים Drosophila באמצעות GCaMP. סרטון הפרוטוקול המוצג מראה כיצד לתעד שינויים בפלואורסצנטיות GCaMP של נוירונים בגוף פטריות במהלך ניסוי מיזוג חוש הריח.

Protocol

פרוטוקול זה הוא קטע מתוך הנקוק ואח ‘, ב Vivo אופטי סידן הדמיה של פלסטיקה סינפטית הנגרמת על ידי למידה ב Drosophila melanogaster, J. Vis. Exp. (2019). 1. בהדמיית סידן vivo השתמש במיקרוסקופ מולטי פוטון המצויד בלייזר אינפרא אדום ומטרת טבילה במים (ראה טבלת חומרים), המותקנת על ?…

Materials

1-Octen-3-ol Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA O5284 Chemical used as odorant
3-Octanol Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA 218405 Chemical used as odorant
4-Methylcyclohexanol Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA 153095 Chemical used as odorant
Bandpass filter for EGFP (525/50 nm) Carl Zeiss Microscopy GmbH, Jena, Germany
Mineral oil Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA M8410 Used as diluent for odorants
Mode-locked Ti-Sapphire laser Chameleon Vision 2 Coherent Inc., Santa Clara, CA, USA Tunable infrared femtosecond laser
Multiphoton Microscope LSM 7MP equipped with BiG detectors Carl Zeiss Microscopy GmbH, Jena, Germany Multiphoton microscope, multiple companies provide similar devices.
Plan-Apochromat 20x (NA = 1.0) water immersion objective Carl Zeiss Microscopy GmbH, Jena, Germany 421452-9900-000 Objective W "Plan-Apochromat" 20x/1.0 DIC M27 70mm
Visual Basics of Applicatons (VBA) software to receive a trigger from the odor-delivery device and the electric shock application device (power supply) to interact with the ZEN software from Zeiss that controls the microscope Custom-written and available upon request n.a. n.a.

Play Video

Citar este artículo
Drosophila In Vivo Calcium Imaging: A Method for Functional Imaging of Neuronal Activity. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20129, doi: (2023).

View Video