Een techniek is beschreven voor het implanteren van vier<em> In vivo</em> Elektroden aan de neuromusculaire controle van voedingsgedrag in monitor<em> Aplysia californica</em>.
Abstract
Het opnemen van belangrijke zenuwen en spieren van de<em> Aplysia</em> Tijdens het voeden gedrag stelt ons in staat om de patronen van neurale controle studie in een intact dier. Gelijktijdig opnemen van meerdere zenuwen en spieren geeft ons precieze informatie over de timing van neurale activiteit. Vorige opname methoden hebben gewerkt voor twee elektroden, maar de studie van extra zenuwen of spieren nodig zijn te combineren en het gemiddelde van de opnames van meerdere dieren, waardoor het moeilijk is om fijne details van de timing en fasering te bepalen, vanwege de variabiliteit van de respons op respons, en van dier naar dier. Implanteren van vier afzonderlijke elektroden heeft een zeer lage kans op succes te wijten aan de vorming van verklevingen die dieren te voorkomen van het uitvoeren van normale voeding bewegingen. We ontwikkelden een nieuwe methode van de elektrode fabricage, dat het grootste deel van de elektroden in het dier waardoor normale voeding bewegingen vermindert. Met behulp van een combinatie van lijm om de elektroden resultaten bevestigen in een meer betrouwbare isolatie van de elektrode, die langer duurt, waardoor het mogelijk om voor periodes zo lang als een week. De fabricage techniek die we beschrijven kan worden uitgebreid tot een aantal extra elektroden te nemen, en zou van toepassing zijn op gewervelde dieren.
Protocol
1. Electrode Fabrication Voor het maken van de elektrode, gebruik van een schaar om een stuk van de email-coating 0,001 inch diameter roestvrij staaldraad ongeveer 2 meter lang snijden. Bevestig een kleine bal van stopverf aan elk uiteinde van de draad, vouw de draad in de helft, en draai de uiteinden om een twisted pair te creëren, een zogenaamde differentieel elektrode. Tape de beide uiteinden van de draad te ontrafelen voorkomen. Maak vier differentiële elektroden, het gebruik van e…
Discussion
Een belangrijke innovatie die heeft deze opnames succesvol is het combineren van de elektroden in een kabel. Twee elektrode opnames zijn gebruikt geweest, maar uitbreiding naar vier afzonderlijke elektroden resulteerde in de vorming van chirurgische adhesies die vaak het dier voorkomen van het maken van normale voeding bewegingen. Het combineren van de elektroden in een kabel vermindert het grootste deel van de elektroden in het dier, dat op zijn beurt vermindert de immuunrespons en laat het dier te bewegen vrijer.
…
Acknowledgements
Wij dankbaar erkennen de steun van de NIH (NS047073 tot HJC). We zijn ook dankbaar dat Catherine Kehl voor haar vroege experimenten met Kwik-Sil, die moedigde ons aan om het te gebruiken voor onze applicatie.
Cullins, M. J., Chiel, H. J. Electrode Fabrication and Implantation in Aplysia californica for Multi-channel Neural and Muscular Recordings in Intact, Freely Behaving Animals. J. Vis. Exp. (40), e1791, doi:10.3791/1791 (2010).