Fabricação de eletrodos e Implantação de Aplysia californica Para gravações multi-canal neural e muscular na Intact, Animais Livremente Behaving
Summary
A técnica é descrita para a implantação de quatro<em> In vivo</em> Eletrodos para monitorar o controle neuromuscular do comportamento alimentar em<em> Aplysia californica</em>.
Abstract
Gravar a partir de nervos e músculos da chave<em> Aplysia</em> Durante o comportamento alimentar nos permite estudar os padrões de controle neural em um animal intacto. Registra, simultaneamente, múltiplos nervos e músculos nos dá informações precisas sobre o momento da atividade neural. Métodos de gravação anterior ter trabalhado por dois eletrodos, mas o estudo de nervos ou músculos adicionais necessários combinando e média das gravações de vários animais, o que tornava difícil determinar detalhes de tempo e eliminação, devido à variabilidade da resposta à resposta e, a partir animal para animal. Implantação de quatro eletrodos indivíduo tem uma taxa de sucesso muito baixa, devido à formação de aderências que impeçam os animais de executar movimentos de alimentação normal. Nós desenvolvemos um novo método de fabricação de eletrodos, que reduz o volume dos eletrodos dentro do animal permitindo movimentos alimentação normal. Usando uma combinação de colas para fixar os resultados eletrodos em um isolamento mais confiável do eletrodo, que dura mais tempo, tornando possível recorde para períodos de até uma semana. A técnica de fabricação que descrevemos poderia ser ampliado para incorporar vários eletrodos adicionais, e seria aplicável a animais vertebrados.
Protocol
Discussion
A principal inovação que fez estas gravações de sucesso é a combinação dos eletrodos em um único cabo. Duas gravações eletrodo tem sido utilizado antes, mas expandindo para quatro eletrodos individuais resultou na formação de aderências cirúrgicas, que muitas vezes impediu o animal de fazer movimentos de alimentação normal. Combinando os eletrodos em um cabo reduz a maior parte dos eletrodos dentro do animal, que por sua vez reduz a resposta imune e permite que o animal se mover mais livremente.
<p c…Acknowledgements
Agradecemos o apoio do NIH (NS047073 para HJC). Nós também somos gratos a Catherine Kehl para ela primeiras experiências com o Kwik-Sil, que nos incentivou a usá-lo para a nossa aplicação.
Materials
| Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Enamel coated stainless steel wire | California Fine Wire | 0.001D, coating h | ||
| Household Silicone II Glue | GE | |||
| Kwik-Sil Adhesive | WPI | |||
| Duro Qwik-Gel superglue | Henkel corp. | |||
| A-M Systems model 1700 amplifier | A-M Systems | Filter settings:100-1000Hz nerves,10-1000Hz I2 muscle | ||
| Axoscope 10.1 | Molecular Devices | |||
| Gold Connector Pins | Bulgin | SA3148/1 | ||
| Gold Connector Sockets | Bulgin | SA3149/1 |
Referencias
- Lu, H., Chestek, C. A., Shaw, K. M., Chiel, H. J. Selective extracellular stimulation of individual neurons in ganglia. J. Neural Eng. 5, 287-309 (2008).
- Morton, D. W., Chiel, H. J. In vivo buccal nerve activity that distinguishes ingestion from rejection can be used to predict behavioral transitions in Aplysia. J Comp. Physiol. A. 172, 17-32 (1993).
- Warman, E. N., Chiel, H. J. A new technique for chronic single extracellular recording in freely behaving animals using pipette electrodes. J. Neurosci. Methods. 57, 161-169 (1995).
- Ye, H., Morton, D. W., Chiel, H. J., J, H. nbsp;Neuromechanics of multifunctionality during rejection in Aplysia californica. J. Neurosci. 26, 10743-10755 (2006).
