Fabbricazione e impianto di elettrodi nel Aplysia californica Per registrazioni multi-canale neurale e muscolare in intatto, Animali liberamente Comportarsi
Una tecnica è descritta per impiantare quattro<em> In vivo</em> Elettrodi per monitorare il controllo neuromuscolare del comportamento alimentare in<em> Aplysia californica</em>.
Abstract
Registrazione da nervi e muscoli chiave di<em> Aplysia</em> Durante comportamento alimentare ci permette di studiare i modelli di controllo neurale in un animale intatto. Contemporaneamente la registrazione da nervi e muscoli più ci dà informazioni precise sui tempi di attività neurale. Metodi di registrazione precedente hanno lavorato per due elettrodi, ma lo studio dei nervi o dei muscoli necessari ulteriori combinando e la media delle registrazioni degli animali multiple, che ha reso difficile determinare dettagli di tempi e graduale, a causa della variabilità di risposta alla risposta, e da animale ad animale. L'impianto di quattro elettrodi individuo ha un tasso di successo molto bassa a causa della formazione di aderenze che impediscono di compiere movimenti animali normale alimentazione. Abbiamo sviluppato un nuovo metodo di fabbricazione di elettrodi che riduce la maggior parte degli elettrodi all'interno dei movimenti degli animali, affinché per l'alimentazione normale. Utilizzando una combinazione di colle per attaccare i risultati elettrodi in un isolamento più affidabile dell'elettrodo che dura più a lungo, rendendo possibile la registrazione per periodi fino a una settimana. La tecnica di fabbricazione che descriviamo potrebbe essere esteso per incorporare diversi elettrodi supplementari e sarebbero applicabili agli animali vertebrati.
Protocol
1. Elettrodo Fabrication Per creare l'elettrodo, usare le forbici per tagliare un pezzo di smalto rivestite 0.001 pollici filo di acciaio inox del diametro di circa 2 metri di lunghezza. Allegare una pallina di gomma pane a ciascuna estremità del filo, piegare il filo a metà, e far girare le estremità per creare un doppino, chiamato elettrodo differenziale. Nastro entrambe le estremità del filo per evitare svelare. Fare quattro elettrodi differenziale, utilizzando un nastro di colore diverso…
Discussion
Una innovazione fondamentale che ha fatto queste registrazioni di successo sta combinando gli elettrodi in un unico cavo. Due registrazioni elettrodi sono stati usati in precedenza, ma l'espansione a quattro elettrodi individuali ha portato alla formazione di aderenze chirurgiche che spesso impedito all'animale di fare movimenti di alimentazione normale. Combinando gli elettrodi in un cavo di ridurre la maggior parte degli elettrodi dentro l'animale, che a sua volta riduce la risposta immunitaria e permette …
Acknowledgements
Noi riconosciamo con gratitudine il sostegno del NIH (NS047073 a HJC). Anche noi siamo grati a Caterina Kehl per lei i primi esperimenti con Kwik-Sil, che ci ha incoraggiato ad usarlo per la nostra applicazione.
Cullins, M. J., Chiel, H. J. Electrode Fabrication and Implantation in Aplysia californica for Multi-channel Neural and Muscular Recordings in Intact, Freely Behaving Animals. J. Vis. Exp. (40), e1791, doi:10.3791/1791 (2010).